卡马替尼capmatinib完全抑制MET磷酸化

　　EBC-1细胞来源于具有MET扩增功能的NSCLC细胞系，对MET-tkis具有较高的敏感性。为了探究MET-tkis耐药的分子机制，我们使用了一种MET抑制剂卡马替尼（capmatinib），该抑制剂目前正在临床试验中进行研究。

　　利用EBC-1细胞株，分别在10nM至1.5、2.2和2.4μmol/L的终浓度范围内，建立了3株耐卡马替尼（capmatinib）的细胞株(EBC-CR1、-CR2和-CR3)，观察其耐药机制。通过连续暴露于更高浓度的卡马替尼（capmatinib）3个月，EBC-CR3细胞系来源于EBC-CR1细胞系。首先，我们通过细胞活力测定来评估这三种耐药细胞系对卡马替尼（capmatinib）的敏感性。

　　MET-TKIs对EBC-CR1-3细胞的IC50为10μmol/L，对EBC-1细胞的IC50为3.70±0.10nmol/L;EBC-CR1细胞占18.15±3.31%，EBC-CR2细胞占8.37±4.61%，EBC-CR3细胞占12.17±3.6%，EBC-1细胞占61.22±4.78%。

　　接下来，我们通过qPCR证实了耐药细胞系中MET基因拷贝数的下降，并伴随着MET磷酸化水平的下调。这些结果表明，卡马替尼（capmatinib）不仅强烈地影响了激酶活性，而且还影响了MET拷贝数，这表明它对MET依赖的肿瘤有较强的疗效。此外，Sanger测序也没有发现额外的met激活突变(数据未显示)。

　　在耐药细胞系中，卡马替尼（capmatinib）完全抑制MET磷酸化，表明不存在阻止卡马替尼（capmatinib）结合的MET突变。尽管可以观察到MET激酶的完全抑制，但在耐药细胞株中，卡马替尼（capmatinib）单次处理并没有完全抑制AKT和ERK1/2的磷酸化。这些结果表明，耐药细胞的“主要”生存途径从MET信号转变为其他替代激酶途径。详情请扫码咨询：