肿瘤中厄洛替尼Erlotinib分布的可视化

　　通过LC-MS/MS测量组织中的厄洛替尼是了解厄洛替尼向肿瘤递送的非常有效的方法。然而，这种技术缺乏空间信息。为了补充LC-MS/MS分析，通过MALDIMSI分析肿瘤组织，这可以确定分析物的存在及其定位。　　

　　为了证明分析方法对厄洛替尼及其代谢物具有特异性，使用2种不同的MALDI-MSI系统iMScope（日本京都岛津）和QExactive（ThermoFisherScientific，Waltham，MA,USA)，以AP-SMALDI(TransMIT,Giessen,Germany)作为离子源。由于iMScope与QExactive相比相对灵敏且产生可重现的强度，因此主要使用该仪器。另一方面，QExactive被用于M14和M13的分析，因为它具有将M14和M13的特定光谱与背景噪声光谱分开的质量分辨能力。在这些组织切片中没有观察到表明厄洛替尼或其代谢物（M14或M13）的信号，因此这里开发的方法可以专门分析厄洛替尼及其代谢物的存在和位置。　　

　　在贝伐单抗(5mg/kg)或人IgG(5mg/kg)后用厄洛替尼(60mg/kg)治疗的小鼠在6小时（ 每个治疗组n=3）、12小时（每个治疗组n =3治疗组）或 厄洛替尼治疗后18小时（每个治疗组n=5），并使用iMScope分析其肿瘤。厄洛替尼在所有时间点均广泛分布于两个治疗组的肿瘤中。在治疗组之间观察到厄洛替尼分布的微小差异。　　

　　然而，观察到的厄洛替尼分布可能只是反映了血液分布。为了明确证明厄洛替尼渗透到肿瘤细胞中，显示活肿瘤中血液分布和厄洛替尼分布之间的相关性非常重要。为了可视化血红素b和厄洛替尼在同一肿瘤区域的分布，在厄洛替尼治疗后6小时收集了来自贝伐单抗(5mg/kg)或人IgG(5mg/kg)后用厄洛替尼(60mg/kg)治疗的小鼠的肿瘤（ 每个治疗组中n=1）并且使用iMScope以40μm的空间分辨率分析活肿瘤区域。在没有血红素b信号的区域可以检测到厄洛替尼。　　

　　由于厄洛替尼具有活性代谢物M14（去甲基厄洛替尼），因此还应分析该代谢物的分布。为了同时分析厄洛替尼和M14的分布，使用了QExactive和AP-SMALDI。M14不能通过这种方法与M13区分开来，因为它具有完全相同的质量。因此，代谢物的光谱是M14和M13的总和。厄洛替尼浓度相对较高的肿瘤组织选自贝伐单抗(5mg/kg)或人IgG(5mg/kg)后用厄洛替尼(60mg/kg)治疗的小鼠，并在6h处死(n =每个治疗组中的1），因为代谢物的浓度被假定为低于厄洛替尼在此类组织中的浓度。使用QExactive进行的测量显示，厄洛替尼及其活性代谢物广泛分布在整个肿瘤组织中。　　

　　最后，厄洛替尼Erlotinib在从接受厄洛替尼(60mg/kg)每天治疗2天（短期）或37天（长期）的小鼠最后一次治疗后3小时收集的肿瘤中的分布（表1)还使用iMScope进行分析（ 每个治疗组中n=2）。厄洛替尼扩散到整个组织，甚至在厄洛替尼难治性肿瘤中。详情请扫码咨询：