易瑞沙/吉非替尼对EGFR的抑制减少了非肝硬化肝癌的发生

　　表皮生长因子受体 (EGFR) 信号通路的激活促进肝细胞腺瘤 (HCA) 和癌 (HCC) 的发展。发现选择性 EGFR 抑制剂吉非替尼（易瑞沙）可预防大鼠肝硬化的肝癌发生。因此，吉非替尼可能会减少肿瘤前肝脏病变向 HCC 的进展。在短期和长期实验中，施用N- 亚硝基吗啉 (NNM) 或肝内移植胰岛的糖尿病 (PTx)、甲状腺切除 (TTx) 的甲状腺滤泡 (TTx) 和卵巢切除 (OTx) 大鼠的卵巢碎片用于诱导改变的肝细胞 (FAH) 病灶。吉非替尼给药两周（20 毫克/千克）或三九个月（10 毫克/千克）。在 NNM 治疗的大鼠中，与对照组相比，吉非替尼给药降低了 FAH 的量。HCA 和 HCC 的数量减少，但没有阻止发展。在所有移植模型中，在短期实验中施用吉非替尼后 FAH 的增殖活性较低。尽管如此，HCA和HCC的负担在后期没有改变。因此，吉非替尼对 EGFR 的抑制减少了非肝硬化肝脏起始阶段的化学和激素也诱导的肝癌发生。然而，进展为恶性肝细胞肿瘤并没有被阻止，这表明 EGFR 信号级联在肝癌发生的后期阶段仅具有有限的相关性。

　　肝癌的发生伴随着多种生长因子的过度表达和多种信号通路的激活，包括 EGF、血管内皮生长因子 (VEGF)、胰岛素样生长因子 (IGF)、MAPK、PI3K/AKT/mTOR 和 Wnt/β-Catenin。它们可能代表了系统性分子疗法的有价值的靶点。EGFR在大多数HCC表达，和EGFR抑制剂如单克隆抗体西妥昔单抗或酪氨酸激酶抑制剂，诸如吉非替尼和厄洛替尼能够在体外和体内抑制HCC生长。

　　在这项研究中，我们研究了 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼（易瑞沙）在各种激素和化学诱导的肝癌发生模型中的抗增殖和抗肿瘤活性。

　　在 NNM 模型中，代表没有当代肝硬化的化学肝癌发生，吉非替尼（易瑞沙）的选择性 EGFR 抑制在起始（早期时间点）和进展（晚期时间点）水平减少了肝癌发生，因为肿瘤前肝脏病变和 HCA 的体积分数并且HCC的数量减少了。这些结果得到了先前关于吉非替尼对二乙基亚硝胺治疗大鼠继发性肝硬化和 HCC 发展的影响的研究结果的支持，这被解释为 HCC 发展的化学预防选择。有趣的是，吉非替尼对 EGFR 的抑制不影响 NNM 诱导的 FAH 的增殖活性，但肿瘤前和肿瘤组织的数量减少，伴随着 EGFR 和 TGFα 表达水平的下调以及相关原癌信号的减少。此外，吉非替尼的抗肿瘤作用可能针对肝细胞以外的细胞。根据后一种假设，已经表明，由于内皮细胞的凋亡诱导和胰腺癌中促血管生成分子的产生减少，吉非替尼的给药导致血管生成的抑制。

　　AKT / mTOR的和Ras的原致癌信号传导途径/ RAF-1 / MAPK，这是在NNM和在PTx 活化，也可以证实到OTX后，但TTX之后不会被略微上调。在 FAH（短时间实验）的起始水平，吉非替尼对 EGFR 的抑制可以降低增殖活性，这与 PTx 和 OTx 后 FAH 中下游信号传导减弱相对应。

　　相反，在长期实验中，吉非替尼（易瑞沙）给药不影响 FAH 的增殖活性或肝细胞肿瘤在进展水平上的发展。此外，吉非替尼给药后下游信号通路上调，表明肝细胞中的耐药机制。必须考虑到，由于严重的副作用，吉非替尼在长期实验中必须以低剂量给药，这可能部分解释了在所研究的各种模型中缺乏对肝肿瘤发展的抑制作用。然而，在肝癌发生的晚期很可能对吉非替尼产生耐药性，并且在人类非小细胞肺癌的治疗中也有描述 和二乙基亚硝胺治疗的大鼠的 HCC。

　　已经描述了 AKT/mTOR 和 Ras/raf-1/MAPK 致癌信号通路对 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂的可能耐药性。肝细胞生长因子/c-Met、IGF-1R 和胰岛素受体等其他生长因子受体激活这些通路可以解释残留肿瘤的出现。此外，在人类 HCC 中也上调的 erb-B 受体家族的其他成员，也可能推动肝癌发生。吉非替尼对这些受体的影响仍然知之甚少。

　　最近，施坦威发现 EGFR 通路在人 c-Met 阳性 HCC 中对 c-Met 抑制起到补偿性存活机制的作用，并且 c-Met 和 EGFR 致癌通路的联合抑制提供了对 HCC 肿瘤生长的卓越抑制.

　　我们可以证实吉非替尼（易瑞沙）治疗后 PTX 大鼠 FAH 中钠/葡萄糖协同转运蛋白 1 (SGLT1) 的上调，这是对无限制增殖和细胞生长的耐药性的另一种可能解释。SGLT1 维持高细胞内葡萄糖水平，导致细胞存活和细胞内稳态，被 EGFR 激活，与其激酶活性无关，因此不受酪氨酸激酶抑制剂的影响。

　　此外，我们发现 EGFR 表达水平上调，主要是在 PTx 后的肝脏病变中，说明长期应用后对吉非替尼（易瑞沙）的耐药性。然而，这种 EGFR 表达的矛盾转换不能用吉非替尼的直接作用来解释，因为它的目标只是 EGFR 酪氨酸激酶的催化域，并抑制了下游信号。肝癌发生中其他活化受体对 EGFR 的反式激活机制，如厄洛替尼处理的 HCC 细胞系 Huh7 中的胰岛素样生长因子受体 1 (IGF-1R) 所显示的那样，将是一个可能的解释。

　　在这项研究中，由于 Dombrowski 等人尚未描述明显的肝细胞肿瘤，因此在该实验环境中首次在门静脉内移植甲状腺滤泡 (TTx) 后可以检测到一些 HCA。尽管在 TTx 后移植肿瘤附近有一个简单的 HCA，但在 TTx 后激素诱导的肝细胞改变中，EGFR 和 TGFα 均未上调。然而，吉非替尼（易瑞沙）治疗诱导增殖活性降低，表明 T3 诱导肝细胞通路，如核甲状腺激素受体激活或相关酶活性，即环氧合酶、葡萄糖-6-磷酸酶或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，受吉非替尼的影响，与其 EGFR 活性无关。微信扫描下方二维码了解更多：