探索达克替尼Dacomitinib活性的潜在机制

　　在我们的手术队列中，我们证实达克替尼在对比增强肿瘤组织中的浓度远高于具有敏感EGFR突变的细胞的IC50值。未评估药物对非增强肿瘤的渗透；因此，尚不清楚将药物递送到非增强的前沿肿瘤是否有助于研究治疗的结果。尽管II期队列未达到PFS6主要终点，但一部分患者经历了至少6个月的持久肿瘤控制。总体而言，这些疗效结果与最近报道的达克替尼在首次复发性EGFR扩增GBM中的II期试验相当。在Sepúlveda-Sánchez等人的研究中，47名患者中有5名(10.6%)达到了PFS6，而在我们的主要疗效人群（B组）中，30名患者中有5名(17%)达到了PFS6。在我们研究的所有组中，56名患者中有5名(8.9%)在12个月内保持无进展，而另一项研究中的47名患者中有4名(8.5%)。在复发性GBM临床试验中，中位OS介于5.0和9.8个月之间；因此，在一部分患者中延长PFS具有临床意义。　　

　　在我们的相关分析中，EGFR扩增不能预测大多数患者的临床获益，因为除1名患者外，其他所有患者都被EGFR扩增。尽管据报道EGFRvIII和EGFRECD突变在临床前对小分子EGFR抑制剂敏感，但在我们的研究中，存档肿瘤组织中这些突变的存在与达克替尼的临床获益无关。尽管EGFR突变与临床获益之间的相关性在统计学上不显着，但我们注意到在那些确实获得临床获益的患者中EGFR突变有积累的趋势。值得注意的是，EGFR的存在突变并不能预测缺乏益处。这些观察结果可能需要在其他EGFR抑制剂试验中评估EGFR突变。　　

　　在我们的研究中，GBM的几个生物学特征可能导致治疗失败和/或EGFR基因改变与临床结果之间缺乏相关性，包括最近关于EGFR突变亚克隆性的启示；瘤内的遗传异质性，经常有多个受体酪氨酸激酶（RTK）的共扩增，GBM肿瘤通过其他共激活的RTK维持下游信号或抑制对EGFR信号的依赖，从而动态响应和抵抗EGFR抑制的能力。肿瘤内异质性可能是孤独的完全反应者（患者16）最终进展的原因，因为肿瘤在远处区域生长而目标病变消退。　　

　　自试验开始以来，几项全面的配对肿瘤测序研究已经证明了GBM肿瘤在肿瘤进展过程中的克隆进化。最近更大系列的配对GBM肿瘤（初始诊断肿瘤和放化疗后复发）发现，虽然EGFR扩增状态一般稳定（约80%保留），但EGFRECD点突变几乎都是亚克隆的，并且EGFRvIII和EGFRECD点突变在复发肿瘤标本中经常丢失或增加。这些研究表明，对于基因选择的疗法，可能需要对直接的、预处理的肿瘤样本进行取样。在我们的研究中，大多数患者(86%)是根据其初始诊断肿瘤标本的EGFR状态入组的，并且在入组时可能已经丢失了EGFR扩增和/或ECD突变。在我们确定即刻治疗前EGFR状态的8名患者中，所有患者均为EGFR扩增，只有3名患者有临床反应，其中2名具有G598V突变。基于这个小样本量，EGFR不太可能扩增预测临床反应，并且观察到两个具有G598V突变的临床反应者是轶事。　　

　　全面的基因组和转录组研究证实，EGFR在GBM中经常发生改变，但也在GBM中发现了许多新的EGFR变异，包括细胞外外显子缺失、细胞内C端缺失以及与相邻基因的融合。这些新变体对EGFR酪氨酸激酶抑制剂的敏感性尚不清楚，并且这些变体的存在几乎只发生在EGFR扩增的肿瘤中，可能影响了我们的研究结果。　　

　　在GBM中EGFR酪氨酸激酶抑制剂的先前试验中，尚未确定药物反应与EGFR表达、激活、EGFR基因扩增或EGFRvIII状态或与激活的Akt和PTEN状态之间的明确相关性。9确定初步预测生物标志物的研究，例如EGFRvIII和完整PTEN的同时存在，未在后续研究中得到证实。最近发现GBM肿瘤及其微环境经常在复发时演变,可能在一定程度上解释了先前报告的矛盾，因为早期的复发性GBM试验分析了最初GBM诊断肿瘤中的EGFR通路状态。在我们的研究中，86%的患者分析了最初的GBM诊断肿瘤。因此，我们没有确定PTEN或Akt状态，而是专注于可用存档肿瘤有限的EGFR基因改变。尽管如此，这些蛋白质的状态仍有可能影响我们患者的反应。　　

　　此外，我们探索了肿瘤来源的EV中RNA作为对达克替尼反应的生物标志物的潜力。先前已在胶质瘤患者中鉴定出血清EV中的肿瘤衍生遗传物质，从理论上讲，与单点肿瘤活检相比，血清EV可以更好地代表整个肿瘤转录组。此外，血清EV的转录组可以反映体内其他细胞对肿瘤存在的反应。在子集分析中，基线血清EV中的转录组特征与获益的患者与对达克替尼固有耐药的患者相关。对特定差异表达基因的检查提供了探索达克替尼活性的潜在机制。例如，LAMTOR2（晚期内体/溶酶体接头、丝裂原活化蛋白激酶[MAPK]和哺乳动物雷帕霉素靶点[mTOR]激活剂），它是MAPK和mTOR信号传导的激活剂，以及CSF1，它编码巨噬细胞集落-刺激因子(M-CSF)在快速进展者中升高。M-CSF与小胶质细胞的募集和极化有关，并在GBM中过度表达，高小胶质细胞含量与预后不良有关。因此可以在GBM中探索具有CSF1抑制作用的组合策略。　　

　　总之，我们观察到达克替尼渗透到增强对比度的GBM肿瘤组织中并以高浓度积聚。然而，只有一小部分EGFR扩增的GBM患者从达克替尼中获得了具有临床意义的益处。我们没有发现EGFR扩增、EGFRvIII或ECD突变状态与临床反应相关。对本研究中纵向获得的循环EV衍生RNA的持续分析可能会揭示临床反应的新标志物。预测性生物标志物的鉴定可以保证未来在遗传富集的GBM人群中对新型达克替尼Dacomitinib组合进行研究。详情请扫码咨询：