老挝元素制药卡马替尼(Capmatinib)的耐药研究

　　扩增的间充质上皮转化因子MET是一种受体酪氨酸激酶 (RTK)，已被认为是非小细胞肺癌 (NSCLC) 的药物靶点。尽管针对MET驱动的 NSCLC正在积极开发多种 MET 酪氨酸激酶抑制剂 (TKI)，但对 MET-TKI 获得性耐药的机制尚未得到很好的阐明。为了了解耐药机制并制定治疗策略，我们使用MET扩增的 NSCLC 细胞系 EBC-1开发了一个体外模型。

　　我们建立了卡马替尼（Capmatinib）抗性 NSCLC 细胞系，并使用 3' mRNA 测序和人磷酸化 RTK 阵列确定了替代信号通路。通过定量聚合酶链反应和细胞增殖试验评估拷贝数变化；在亲本细胞系 EBC-1 和抗性细胞系之间比较 RTK 和下游效应子的激活。

　　结果

　　我们发现 EBC-CR1 显示出依赖于表皮生长因子受体 (EGFR) 的生长和对阿法替尼（一种不可逆的 EGFR TKI）的敏感性。过表达 EGFR-MET 异源二聚体的 EBC-CR2 细胞对卡马替尼与阿法替尼的组合有显着反应。此外，源自 EBC-CR1 细胞的 EBC-CR3 细胞通过放大的磷酸肌醇 3 激酶催化亚基 α (PIK3CA) 激活 EGFR，对阿法替尼与磷酸肌醇 3-激酶α (PI3Kα) 抑制剂 BYL719 的组合敏感。

　　结论

　　我们的体外研究表明，EGFR 信号传导的激活和/或下游效应子（如PIK3CA）的基因改变是卡马替尼（Capmatinib）耐药 NSCLC 细胞系使用的替代耐药机制。此外，MET、EGFR 和 PI3Kα 抑制剂联合治疗可能是卡马替尼耐药 NSCLC 患者的有效治疗策略。

　　已发现受体酪氨酸激酶 (RTK) 及其配体在各种人类癌症中发生基因改变和过度表达，因此被视为癌症的治疗靶点。器官再生和组织损伤修复需要间充质上皮转化因子 (MET) 及其配体肝细胞生长因子，这类似于肿瘤侵袭的病理过程。因此，MET 信号级联的异常激活包括多个下游效应通路，如信号转导和转录激活因子 3 (STAT3)、大鼠肉瘤 (RAS)/丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 和磷酸肌醇 3-激酶 (PI3K) /AKT，发生在多种癌症中；还观察到与其他 RTK 的受体串扰。MET可以通过突变，扩增和/或过表达被激活。

　　肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因。已在非小细胞肺癌 (NSCLC) 中检测到MET 的基因改变，并在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 (EGFR-TKI) 初治 NSCLC 患者中报告了MET扩增，患病率为 1.4% 至 21%。在 NSCLC 中，MET 的扩增导致其配体缺失时的组成型激酶活性；过表达作为下游信号通路（如 PI3K/AKT 通路）的致癌驱动因子和激活因子。

　　MET 是包括 NSCLC 在内的癌症的有吸引力的治疗靶点，并且MET 的扩增是对 MET-TKI 敏感性的极好预测标志物。卡马替尼 (INC280, Novartis) 是一种高效选择性的 MET 小分子抑制剂。在人类激酶检测中，卡马替尼对 MET 的选择性是 > 10,000 倍。此外，卡马替尼在 MET 依赖性细胞系和患者肿瘤中显示出对细胞生长和 MET 依赖性存活信号活性的有效抑制。尽管在MET扩增的 NSCLC 中观察到对 capmatinib 的显着反应，对卡马替尼的获得性耐药是不可避免的。因此，体外NSCLC 细胞系模型有助于确定卡马替尼耐药的分子机制并制定克服它的策略。

　　在这项研究中，我们建立了对卡马替尼表现出获得性耐药的MET扩增 NSCLC 细胞系，并评估了其耐药机制。我们证明了卡马替尼耐药的 NSCLC 细胞依赖于替代途径的激活。尽管获得性耐药，EGFR 或 PIK3CA 的联合抑制显着抑制卡马替尼耐药 NSCLC 细胞系的细胞增殖和下游信号，这表明这种组合可能是针对 NSCLC 患者的 MET-TKI 耐药的有效治疗策略。

　　在这项研究中，我们观察到 EGFR mRNA 过度表达，而没有EGFR激活突变或扩增，如上所述。这些发现表明，对卡马替尼的常见耐药性是通过激活 MET 激酶之外的信号通路，而不是通过特定基因的遗传改变而发生的。此外，EGFR 信号的部分或完全参与是针对卡马替尼的一种耐药机制，这表明在 MET 依赖性癌细胞中是一种优选的替代信号通路。

　　先前的临床研究报告了 NSCLC 患者中的de novoMET扩增。MET扩增可以是临床前和临床研究结果[的基础上对MET-TKI的可成药目标。因此，已经报道了 MET-TKI 用于多种癌症的临床前和临床试验。目前正在进行临床试验的卡马替尼（Capmatinib ）是一种非常有选择性和有效的 MET 特异性药物，用于治疗 MET 依赖性癌症。然而，对 MET-TKI 的获得性耐药的快速发展一直是对疗效的关键限制。尽管如此，迄今为止仅阐明了 MET-TKI 的少数耐药机制。微信扫描下方二维码了解更多：