艾曲波帕eltrombopag可以改善UCB直接体内移植

　　脐带血(UCB)移植是一种很有前途的治疗方法，但受到了干细胞缺乏的挑战。Eltrombopag是一种非肽，血小板生成素(TPO)受体激动剂，它选择性地激活人类和黑猩猩的c-Mpl。我们研究了艾曲波帕对人脐血造血干细胞(HSC)和造血祖细胞(HPC)增殖的影响及其对体内造血功能的影响。在NOD/SCID小鼠异种移植模型中，艾曲波帕选择性地增加了人骨髓腔内CD45+、CD34+和CD41+细胞的增殖，但对小鼠骨髓细胞没有影响。因此，艾曲波帕增加了人的外周血血小板和白细胞。　　

　　我们进一步研究了无血清培养中STAT和AKT信号通路的影响。艾曲波帕扩展了人CD34+CD38−、CD34+和CD41+细胞。艾曲波帕和重组人TPO(rhTPO)均可诱导CD34+CD41−、CD34−CD41+和CD34−CD41−细胞的STAT5磷酸化。rhTPO优先诱导CD34−C41+细胞中的pSTAT3、pAKT和更多的pSTAT5，而艾曲波帕对pSTAT3无影响。综上所述，艾曲波帕促进了人脐部造血干细胞/造血干细胞在体内、体外的扩张，并通过在体内扩张人脐部骨髓造血干细胞/造血干细胞促进了多系造血功能。Eltrombopag与rhTPO在信号转导途径上有所不同，前者有利于早期的HSC/HPC群体。　　

　　在干细胞移植环境下，骨髓的重建和外周血细胞的恢复依赖于供体细胞的造血干细胞和造血干细胞的扩张和分化。在这篇报道中，我们研究了艾曲波帕在接受人UCBCD34+细胞的NOD/SCID小鼠异种移植后对人UCBCD34+细胞的影响。我们发现，艾曲波帕治疗加速了人CD34+祖细胞、人CD45+和CD41+细胞在骨髓中的扩张，并促进了循环的人血小板和白细胞的产生，而对小鼠造血细胞没有任何影响。　　

　　到第9周，也就是停止艾曲波帕喂养后的第5周，艾曲波帕处理的小鼠与对照组小鼠的差异仍然存在。艾曲波帕的多重谱系和长期效应强烈提示，除促进巨核形成的预期作用外，艾曲波帕还在HSC/HPC水平上作用于“早期造血”，这是一个更有说服力的后期阶段。

　　为了进一步研究艾曲波帕通过造血干细胞/造血干细胞对早期造血功能的影响，我们在无血清培养基中检测了艾曲波帕在SCF和FL存在的情况下对人UCBCD34+细胞的扩增能力。艾曲波帕显著扩增了CD34+CD38−造血干细胞/造血干细胞、CD34+未成熟祖细胞和CD41+细胞。与的影响相比3μg/ml艾曲波帕10ng/mlrhTPO并不影响的百分比CD34+CD38−，CD34+和CD41+细胞，但显著提高了扩张，支持这一事实艾曲波帕传真照片一样有效调节增殖和分化的平衡中CD34+CD38−，CD34+和CD41+细胞。　　

　　然而，艾曲波帕在促进增殖方面不如TPO强。我们的发现与最近的一份报告一致，该报告表明，艾曲波帕能够在无血清培养中，在SCF存在的情况下扩大CD34+CD38−细胞，这表明它至少部分保留了TPO在早期造血中的功能。　　

　　艾曲波帕和TPO的差异提示c-Mpl介导的星状细胞/HPCs的增殖与分化可能存在细胞内信号通路的分离。寻找背后的潜在机制功能传真照片和艾曲波帕之间的区别，我们进行了一项cytometry-based方法分析STAT3磷酸化，STAT5和AKT传真照片受体的信号通路(c-Mpl)，在三种不同的细胞类型:CD34+CD41−HSC/HPC，CD34−CD41+巨核细胞，和CD34−CD41−细胞。我们发现，艾曲波帕诱导的STAT5磷酸化水平在三种细胞群中都是相似的，在CD34+CD41−和CD34-CD41−细胞中与TPO刺激的水平相当，但在CD34-CD41+细胞中TPO刺激的STAT5磷酸化水平更高。　　

　　这种细胞群比其他两种细胞群更倾向于血栓形成。我们还观察到TPO激活了CD34−CD41+细胞中的STAT3和AKT，而艾曲波帕没有磷酸化CD34−CD41+细胞中的STAT3和AKT通路。因为在我们的体内模型中，艾曲波帕和TPO一样有效地促进CD41+细胞的分化，我们的发现提示STAT3和AKT信号通路在CD34+细胞向CD41+细胞的分化中可能并不重要。　　

　　众所周知，TPO与c-Mpl的结合激活正常人CD34+细胞、巨核细胞和血小板中的MAPKp42/p44、AKT和STAT蛋白；而艾曲波帕在N2C-TPO细胞中激活MAPKp42/p44和STAT5，在人类巨核细胞中激活STAT5。在人的血小板中，艾曲波帕可诱导STAT1、STAT3和STAT5激活，但避免AKT磷酸化。在急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者的骨髓细胞中，艾曲波帕激活的是STAT5而不是STAT3。结合我们的研究结果和已发表的报告，我们发现艾曲波帕对下游信号通路的激活不同于TPO，尽管两者都是通过TPO-r(c-Mpl)结合发挥作用的。　　

　　据我们所知，我们的论文是首次发现血栓生成剂艾曲波帕(eltrombopag)具有在体内扩展UCBCD34+的潜力。这一发现的意义在于，尽管在UCBCD34+细胞体外扩增方面做了大量的研究，但与PBSC移植或骨髓干细胞移植相比，目前UCB干细胞移植的成功率仍然较低。如果艾曲波帕可以改善UCB直接体内移植，这将需要测试在未来的临床试验，它可能可以否定的需要“体外”联合干细胞扩张过程，或协同工作的“体外”扩张UCBCD34+细胞，加强联合移植的成功率。详情请扫码咨询：