易瑞沙/吉非替尼可抑制博来霉素诱导的肺纤维化

　　肺纤维化 (PF) 是一种危及生命的间质性肺疾病。在这项研究中，我们试图揭示高迁移率组盒 1 (HMGB1) 和α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) 之间的作用模型以及易瑞沙/吉非替尼在博莱霉素气雾剂给药诱导的肺纤维化中的保护作用。老鼠。对于机制研究，在建模两周后收获肺组织，通过免疫组织化学和免疫荧光染色检测 HMGB1 和α-SMA的共表达。使用下拉测定法分析蛋白质-DNA 相互作用以研究 HMGB1 和α之间的关系-SMA。对于吉非替尼治疗研究，将小鼠分为三组：磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 对照组、PBS 处理的 PF 组和吉非替尼处理的 PF 组。在博来霉素治疗两周后进行吉非替尼或 PBS（20 毫克/公斤/天）的管饲，直到小鼠被处死。收集肺和血液样品，以评估组织学改变，氧化应激和NOXs，HMGB1，EGFR，MAPKs的，AP-1，和NF-的表达κ乙以确定疗效和相关的分子机制。结果显示在纤维化肺的一些间质细胞中α-SMA和HMGB1的高共表达。DNA-蛋白质下拉分析证明 HMGB34367 作为α的新转录因子-SMA 启动子并参与肺纤维化的最终发展。其次，吉非替尼可显着降低肺纤维化变化和MDA水平，恢复T-AOC水平。同时，吉非替尼也可以减少NOX1 / 2/4，HMGB1，对EGFR，P-ERK，P-JNK，对P38，对NF-κB，PC-君，和PC-Fos表达水平在纤维化肺。本研究表明，吉非替尼可以通过HMGB1减轻肺纤维化/ NOXs-ROS / EGFR-的MAPK-AP-1 / NF-κ中博来霉素诱导的肺纤维化B信号。

　　在本研究中，我们证明了 HMGB1 和α-SMA之间的关系以及易瑞沙/吉非替尼在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化中的治疗效果。首先，我们证明了 HMGB1 蛋白家族 (HMGB34367) 的一个成员可以作为α-SMA 启动子的新型转录因子并参与肺纤维化过程。其次，我们发现，吉非替尼在降低小鼠肺纤维化，这可能会与HMGB1 / NOXs-ROS / EGFR-的MAPK-AP-1 / NF-相关联是有效的κ乙信号。

　　首先，我们专注于 HMGB1 在肺纤维化发展中的作用。HMGB1 在纤维化肺组织中高表达，抑制 HMGB1 可显着减轻小鼠肺损伤。科学家主要将这一现象归因于其作为重要炎症因子的作用，炎症是肺纤维化的关键病理过程。然而，HMGB1 的详细分子机制仍然未知。免疫组织化学和免疫荧光结果显示HMGB1位于一些α-SMA染色也呈阳性的间质细胞中。RT-PCR分析还表明α的mRNA表达-SMA 在 BLM 处理后与 HMGB34367 的 mRNA 表达增强同时增加。此外，我们发现HMGB34367通过使用DNA-核蛋白下拉方法参与α-SMA表达的调节。HMGB34367 是一种 20 kDa 的蛋白质，属于特定蛋白质组，其中大部分与 HMGB1 具有相同的结构。HMGB34367 的全长序列与 HMGB1 蛋白的 1 到 178 个氨基酸区域相同，其中包括两个 DNA 结合域，框 A 和框 B，但缺少 HMGB1 的 179-215 酸性 C 末端尾区。HMGB1 是一种高度保守的核蛋白，可以稳定核小体并允许 DNA 弯曲以促进某些基因转录。总之，我们的结果表明 HMGB1 可能主要通过（i）消化成不同形式并促进α-SMA 基因作为转录激活因子激活和（ii）由激活的单核细胞和巨噬细胞分泌并表现为炎症的方式参与肺纤维化细胞因子。

　　接下来，我们研究了易瑞沙/吉非替尼对肺纤维化的影响。事实上，吉非替尼减轻肺纤维化的潜力仍然存在争议。哈迪等人。证明吉非替尼可以通过降低 EGFR 表达和逆转小鼠的形成性纤维化来明显缓解小鼠的肺纤维化。随后，石井等人。发现所有不同口服剂量（20 mg/kg、90 mg/kg和200 mg/kg）的吉非替尼均可抑制小鼠肺纤维化，且大剂量吉非替尼不会诱发或加重肺纤维化。然而，铃木等人和李等人表明易瑞沙/吉非替尼治疗可显着加重小鼠和大鼠的肺纤维化。此外，一些日本患者报告了与吉非替尼治疗相关的严重肺间质疾病，这意味着吉非替尼可能会诱发或加重这种疾病。事实上，对于不同的结果，有几种可能的解释。首先，这可能与不同品种的小鼠或大鼠因其遗传特征对吉非替尼的反应不同有关。其次，吉非替尼的不同剂量是导致结果矛盾的重要因素。更高剂量的吉非替尼可能导致毒性大于治疗。第三，EGFR在不同品种啮齿动物中的表达和激活及其对不同剂量吉非替尼的反应直接影响了促进或抑制肺纤维化的MAPK信号。第四，实验中吉非替尼的给药时间和给药方法也影响了结果。在我们之前的一系列研究中，我们发现易瑞沙/吉非替尼明显抑制了博来霉素在纤维化小鼠中诱导的肺胶原沉积和α-SMA 表达。

　　总之，我们全面研究了 HMGB1 分子的作用、氧化-抗氧化失衡的参与以及吉非替尼治疗下游的相关分子转导机制在博来霉素诱导的肺纤维化中。这些结果表明，HMGB1促进了肺纤维化和易瑞沙/吉非替尼减毒博莱霉素诱导的胶原沉积和过度氧化应激，主要通过抑制HMGB1 / NOXs-ROS / EGFR-的MAPK-AP-1 / NF-κB信号。目前的发现有可能从根本上推进我们对肺纤维化分子机制的理解，并可能对设计针对肺纤维化的新型创新治疗方法具有重要意义。微信扫描下方二维码了解更多：