抗PD-1联合曲美替尼(Mekinist)抑制肿瘤生长

　　肝内胆管癌 (iCCA) 占原发性肝癌的一小部分，但 5 年生存率仅为 10%。免疫检查点抑制剂可有效治疗许多实体癌，但免疫检查点抑制剂单药治疗对 iCCA 没有明显益处。丝裂原活化激酶 (MEK) 抑制剂，如曲美替尼（Mekinist），通过抑制细胞增殖和改变肿瘤微环境，在 iCCA 的临床前研究中显示出有希望的结果。本研究旨在展示曲美替尼与抗程序性细胞死亡蛋白 1 (PD-1) 治疗在不同 iCCA 小鼠模型中的潜在益处。

　　方法

　　在这里，我们评估了曲美替尼在小鼠（SB1 和 LD-1）和人（EGI-1）胆管癌细胞系中的体外细胞毒性。我们在皮下、原位和质粒诱导的 iCCA 小鼠模型中检查了单药曲美替尼、抗 PD-1 以及两者组合的疗效。流式细胞术分析用于阐明治疗后肿瘤免疫微环境的变化。对 SB1 肿瘤细胞系进行全外显子组测序 (WES)，以将这种临床前模型与患者的 iCCA 相关联。

　　结果

　　曲美替尼（Mekinist）在体外减少了 SB1、LD-1 和 EGI-1 肿瘤细胞的肿瘤细胞生长。曲美替尼治疗导致体外肿瘤细胞上主要组织相容性复合物 (MHC-I) 和程序性细胞死亡配体 1 (PD-L-1)（程序性细胞死亡配体 1）的上调。与单独使用任何一种药物相比，曲美替尼和抗 PD-1 的组合在几种 iCCA 肿瘤模型中降低了肿瘤负荷，并提高了 SB1 荷瘤小鼠的存活率。荷瘤小鼠的免疫分析显示肝脏效应记忆 CD8+和 CD4+T 细胞增加，以及 CD8+脱粒增加T 细胞，表明细胞毒性增强。WES 和体细胞突变分析显示 SB1 肿瘤细胞中没有 KRAS、BRAF 和 ERK 突变，并且在 iCCA 患者队列中发现了类似的 SB1 遗传特征。

　　结论

　　总之，我们的研究表明，曲美替尼（Mekinist）通过上调 MHC-I 表面表达来提高肿瘤细胞的免疫原性。与抗 PD-1 的组合导致 iCCA 的最佳治疗效果。SB1 细胞的 WES 表明 KRAS 野生型 iCCA 也对这种联合疗法有反应。

　　ICI 是一种很有前景的治疗策略，已显示出对多种恶性肿瘤患者的益处。ICI 在肝脏恶性肿瘤患者中的使用仍然具有挑战性，因为 ICI 治疗的有希望的结果在肝细胞癌或 iCCA 中无法重现。就在最近，由于在比较这种抗 PD-L1 + 抗血管内皮生长因子治疗方案与索拉非尼。由于存在大量免疫细胞的肝脏具有耐受性，因此免疫疗法尤其具有挑战性。因此，对于 iCCA 患者，仍然没有可用的 ICI 疗法，选择有效的联合合作伙伴可能是提高 ICI 疗效的有希望的策略。

　　为了研究曲美替尼（Mekinist）对 iCCA 肿瘤细胞的影响，我们在体外使用了 25 nmol/L 的浓度。与最近使用 100 nmol/L 曲美替尼治疗 Mia-PaCa2 细胞的出版物相比，这是较低的剂量。此剂量的单一疗法在体外对肿瘤细胞的生长有适度的抑制作用。然而，小鼠中的 LD-1 和 SB1 侧腹肿瘤显示对曲美替尼治疗的强烈反应。有趣的是，当停止曲美替尼治疗时，我们观察到肿瘤生长加速，导致单独使用曲美替尼治疗的组没有生存获益。这与最近的一项临床试验一致，该试验表明曲美替尼治疗胆道癌没有提高生存率。我们假设曲美替尼对提高其免疫原性的肿瘤细胞有直接作用。事实上，曲美替尼治疗在体外增加了肿瘤细胞上的 MHC-1 和 PD-L1 表面表达。因此，我们推断添加靶向 PD-1/PD-L1 轴的单克隆抗体可以增强这种疗法。事实上，联合治疗显着提高了携带 SB1 侧腹肿瘤的小鼠的存活率。

　　曲美替尼（Mekinist）长期作用不足的另一种解释可能是曲美替尼对 T 细胞的影响。其他人已经证明曲美替尼对淋巴细胞具有直接的免疫抑制作用。在我们的研究中，我们观察到接受曲美替尼治疗的小鼠的 CD8 T 细胞的脱颗粒和 IFNγ 产生类似的趋势，尽管这没有达到统计显着性。然而，曲美替尼的这种免疫抑制作用在联合治疗组中被逆转。此外，抗 PD-1 + 曲美替尼增加了效应记忆 T 细胞的百分比，并改善了对 CD4+SB1 肿瘤细胞的重新识别体外 SB1 荷瘤小鼠的 T 细胞。我们的结果表明，抗 PD-1 + 曲美替尼的组合可释放免疫系统，并代表了 iCCA 患者的潜在治疗方法。微信扫描下方二维码了解更多：