索拉非尼(Sorafenib)用于皮肤T细胞淋巴瘤治疗

　　皮肤 T 细胞淋巴瘤 (CTCL) 的治疗因恶性 T 细胞对凋亡的明显抵抗而变得复杂，这种抵抗可能是由晚期患者的 NRAS 突变引起的。这些突变与总体存活率降低相关，但使各自的 CTCL 细胞对 MEK 抑制诱导的细胞凋亡敏感，这代表了 CTCL 中一个有希望的新治疗靶点。在这里，我们展示了多激酶抑制剂索拉非尼（Sorafenib）在 NRAS 突变的 CTCL 细胞中诱导细胞凋亡。CTCL 细胞系和来自没有 NRAS 突变的 Sézary 患者的少量原代 T 细胞也受到索拉非尼诱导的细胞凋亡的影响，表明 NRAS 突变对索拉非尼诱导的细胞凋亡具有敏化作用。当将索拉非尼与已建立的 CTCL 药物 Vorinostat 结合使用时，我们检测到 CTCL 细胞的细胞死亡敏感性增加。联合治疗在非突变和突变 CTCL 细胞的凋亡诱导中具有协同作用。从机制上讲，索拉非尼和伏立诺他的这种协同凋亡诱导是基于抗凋亡蛋白 Mcl-1 的下调，而不是其他 Bcl-2 家族成员的下调。总之，这些发现表明索拉非尼联合伏立诺他代表了一种治疗 CTCL 患者的新型治疗方法。

　　我们发现激活 CTCL 细胞系和患者细胞中的 NRAS 突变对多激酶抑制剂索拉非尼（Sorafenib）的治疗敏感。这证实了之前的数据表明 NRASQ61R突变使不同的良性和恶性细胞类型对 MEK 抑制敏感，或者 NRASG13A突变赋予对细胞凋亡的抗性。先前的数据表明，包括 NRAS 在内的 MAPK 通路的异常激活不仅源于 NRAS 突变。该通路与已显示在 CTCL 细胞中发生改变的其他信号通路相互作用，包括 NFκB、TCR 和 PLCγ1 信号通路。因此，即使在非突变细胞中，这些途径也可以诱导 MAPK 活化。此外，已经表明，失调或删除的转录因子（如 E2A）可通过下调抑制因子（如 RasSF4）导致 RAS 途径的间接激活。这些关于 CTCL 细胞中异常 MAPK 激活的发现表明，索拉非尼是具有 RAS 突变的晚期 CTCL 患者的有希望的治疗选择。值得注意的是，索拉非尼在 1 μM 至 3 μM 范围内的低分子浓度下诱导细胞凋亡，这已被证明在血浆中具有临床相关性。处理 48 小时后，在 10 μM 索拉非尼浓度下，HCC 细胞系中的特定细胞凋亡率达到了约 30% 。我们已经在较低浓度的索拉非尼下观察到细胞凋亡。由于索拉非尼不仅抑制 BRAF 和 CRAF，而且还阻断其他几种可能与 CTCL 细胞有效相关的途径。

　　尽管如此，特定抑制剂对 MEK（主要 RAS/RAF 靶点）的抑制也优先诱导 Hut78 细胞中的细胞死亡。然而，与索拉非尼相比，MEK 抑制剂导致基础 ERK 信号的下调更强，表明索拉非尼也通过不同的途径起作用，并且索拉非尼在阻断 ERK 信号传导方面不如 MEK 抑制剂有效。该途径可能包括已知的靶基因 EGFR、PDGFR、c-Kit 和 Flt-3。此外，索拉非尼抑制 RAS 通路，从而使 Hut78 细胞敏感。据报道，索拉非尼不是特定的 BRAFV600E抑制剂 (14)。特定的 BRAFV600E突变对于确认 NRAS 或 KRAS 突变的晚期 CTCL 患者的推定治疗很重要。必须在原代患者细胞上评估索拉非尼或 MEK 抑制剂（如 AZD6244 或 PD0325901）的效果，以选择最佳治疗条件。我们发现 90 名患者中有 4 名携带 NRAS 和 KRAS 突变。不幸的是，这四名患者中有三名因疾病进展而死亡，而一名患者在随访期间退出，阻止了我们研究中对原代 CTCL 细胞的进一步研究。

　　两篇出版物表明，过度活化的 RAS 通路导致抗凋亡 Bcl-2 家族成员 Bim 的下调，从而阻止细胞凋亡。然而，我们无法观察到抑制剂处理对 Bim 的影响，表明 BIM 不参与该过程（数据未显示）。此外，索拉非尼对 RAF-RAS 通路的抑制显示会导致肝细胞中抗凋亡蛋白 Mcl-1 的下调。这现在在 CTCL 细胞系 Hut78 中得到证实，其中索拉非尼（Sorafenib）单独导致 Mcl-1 表达减少。伏立诺他在几个国家被批准用于治疗 CTCL，尽管它作为单一疗法的治疗成功有限。然而，临床前研究表明，伏立诺他与索拉非尼一起可以在其他肿瘤实体中协同作用。虽然这种药理协同作用的机制尚未完全阐明，但有几个发现有助于解释。最近发现，RAS 突变可以上调 HDAC，从而导致对伏立诺他治疗的耐药性。相比之下，索拉非尼已被证明可诱导 HDAC 的下调，从而增强组蛋白乙酰化，从而也增强了 Vorinostat 的表观遗传效应，进一步表明索拉非尼和 Vorinostat 的组合使用。事实上，在突变 CTCL 细胞系 Hut78 中，索拉非尼和伏立诺他同时治疗以协同方式诱导细胞凋亡。对于不携带 RAS 突变的 CTCL 患者的 T 细胞也观察到了协同作用，表明索拉非尼的作用也可以在非突变肿瘤细胞中得到增强。

　　有趣的是，健康供体的 T 细胞在索拉非尼和伏立诺他联合治疗后没有表现出协同的细胞死亡诱导，这表明 T 细胞的恶性转化和抗凋亡对于两种药物的协同治疗效果是必要的。关于这种协同效应的潜在机制，我们检测到索拉非尼和伏立诺他协同下调抗凋亡 Bcl-2 家族成员 Mcl-1。Mcl-1 下调被确定为协同机制的主要部分。尽管如此，索拉非尼的组蛋白乙酰化促进作用可能有助于协同作用，因此可以解释协同作用对恶性 T 细胞的限制。

　　因此，索拉非尼（Sorafenib）联合伏立诺他可能作为 RAS 突变或 RAS 非突变 CTCL 患者的新治疗策略。这是特别令人感兴趣的，因为 1 期试点研究的第一个临床数据显示，索拉非尼治疗 CTCL 患者的结果令人鼓舞，11% 的患者完全缓解。尽管这项研究的结果受到患者数量少的限制，但它证实了我们的发现，并进一步推动索拉非尼作为未来可能的 CTCL 治疗选择，特别是与其他针对不同途径的 CTCL 药物联合使用，尤其是 HDAC 抑制剂，如 Vorinostat。微信扫描下方二维码了解更多：