多吉美/索拉非尼影响体外肝细胞癌的增殖和活力

　　肝细胞癌 (HCC) 显示出显着的异质性，被认为是一种预后不佳的化学耐药性肿瘤。在之前的研究中，我们观察到 HCC 患者血清鞘脂的显着变化。本研究旨在研究多吉美/索拉非尼（最广泛使用的全身性 HCC 药物）对鞘脂通路的体外作用以及抑制 HCC 中的鞘脂通路的作用。Huh7.5 和 HepG2 细胞用索拉非尼刺激，并评估了鞘脂途径抑制剂和细胞增殖、活力和生物活性代谢物的浓度。我们观察到细胞增殖和活力显着下调，同时在索拉非尼刺激下双氢神经酰胺上调。有趣的是，伏马菌素 B1 (FB1) 和一般鞘氨醇激酶抑制剂 SKI II 能够更显着地抑制 HepG2 和 Huh7.5 细胞中的细胞增殖，而对二氢神经酰胺的形成没有一致的影响，因此暗示参与了不同的代谢途径。

　　总之，我们的研究表明，多吉美/索拉非尼、FB1 和 SKI II 治疗后 HCC 增殖显着下调，而它们似乎独立于鞘脂发挥抗增殖作用。当然，还需要进一步的数据来阐明 FB1 和 SKI II 作为 HCC 中推定的新型治疗靶点的潜力。因此意味着不同代谢途径的参与。总之，我们的研究表明，索拉非尼、FB1 和 SKI II 治疗后 HCC 增殖显着下调，而它们似乎独立于鞘脂发挥抗增殖作用。当然，还需要进一步的数据来阐明 FB1 和 SKI II 作为 HCC 中推定的新型治疗靶点的潜力。因此意味着不同代谢途径的参与。

　　鞘脂途径在细胞存活中起着重要作用，鞘脂作为调节肝细胞稳态的关键代谢物出现。本研究的目的是探讨多吉美/索拉非尼（迄今为止最常用的全身性 HCC 疗法）是否对鞘脂代谢产生影响。此外，还研究了鞘脂途径的修饰是否影响体外 HCC 的增殖和活力。此外，之前未研究索拉非尼与特定 SPHK 抑制剂 SLP 和 SLM 联合的影响。目前的数据表明，用索拉非尼刺激 HCC 细胞系会诱导二氢神经酰胺的上调，但细胞活力的降低主要不是由于观察到的鞘脂途径的改变。此外，用 FB1，尤其是 SKII 刺激能够显着下调 HCC 细胞系的增殖。有趣的是，这种下调发生而不会影响二氢神经酰胺的形成。

　　先前的研究表明，多吉美/索拉非尼能够调节各种代谢途径，特别是关于鞘脂。索拉非尼与伏立诺他的组合在各种肿瘤细胞系中诱导了与 CD95 信号相关的细胞死亡的神经酰胺依赖性促进，并且在 CD95 激活的上游观察到了二氢神经酰胺的升高。然而，这两项研究都侧重于共刺激，而没有研究单独使用索拉非尼进行治疗。

　　由于鞘脂途径已被证明影响 HCC 病理生理学，我们假设用鞘脂途径抑制剂刺激 HCC 细胞系可能在体外调节 HCC 增殖。在目前的研究中，使用了神经酰胺合酶抑制剂 FB1、特异性 SPHK1 抑制剂 SLP7111228、特异性 SPHK2 抑制剂 SLM6031434 和两种 SPHK 的抑制剂 SKI II。有几项研究表明，S1P 可能主要通过 SPHK1 的作用促进 HCC 的侵袭和转移。此外，各种研究表明，额外抑制 SPHK 可以支持索拉非尼治疗。这不仅可以在 HCC 细胞系中显示，但也存在于胆管细胞癌细胞系、胰腺癌 (Bxpc-3) 和肾癌 (A-498) 细胞 。

　　在目前的研究中，我们可以证明 FB1 尤其是 SKI II 能够比多吉美/索拉非尼更有效地减少 HepG2 和 Huh7.5 细胞的增殖。因此，我们研究了这些影响是否是由于细胞凋亡或坏死的诱导增加所致。正如目前的研究所示，索拉非尼能够诱导 HepG2 细胞和 Huh7.5 细胞凋亡。有趣的是，FB1 和 SKI II 均未诱导两种细胞系中增加的细胞凋亡或坏死。然而，进一步研究的数据表明，FB1 能够在不同的细胞系中诱导细胞凋亡，能够向 IHKE 细胞（近端小管细胞）证明这一点。此外，可以证明用 1.25 μM FB1 刺激 SNO 细胞导致诱导细胞凋亡。FB1 刺激还导致 Ges-1 细胞凋亡增加。此外，SKI II 还显示可诱导 HL-60 和 U937 细胞、RNK-16 和 NKL 细胞以及 HeLa 和 SiHa 细胞的细胞凋亡 。由于我们目前的数据与上述结果相矛盾，我们假设 FB1 和 SKI II 诱导细胞周期停滞可能类似于对观察到的争议的可能解释。证明用 5 μM FB1 刺激已经足以诱导 CV-1 细胞中的细胞周期停滞。此外，可以表明在 SD 大鼠中施用 FB1 导致与细胞周期相关的基因表达发生变化。用 FB1 刺激大鼠脑胶质瘤细胞系 C6 也导致细胞周期停滞。有趣的是，这是在不能影响细胞活力的浓度下观察到的。在目前的研究中，我们观察到增殖的减少以及细胞活力，因此假设HepG2和Huh7.5细胞中的细胞周期停滞是可能的。其他作者进一步暗示，FB1 显着影响细胞色素 P450 的表达，进而影响体外 HCC 的重要功能通路。然而，由于 FB1 是一种真菌毒素，在体内 HCC 中具有众所周知的促进作用，因此需要进一步的数据来破译其在 HCC 发病机制中的机制作用。微信扫描下方二维码了解更多：