血脂异常导致血浆米托坦(Mitotane)测量值高估

　　Mitotane (米托坦）是晚期肾上腺皮质癌 (ACC) 的标准治疗方法。建议监测血浆米托坦水平以寻找 14 至 20mg/L 之间的治疗窗口，但其阳性预测值需要优化。我们报告了一例有血脂异常病史的 ACC 患者，在接受米托坦治疗后，发现其血浆米托坦水平 >30mg/L，同时具有出色的神经耐受性。这一观察结果使我们比较了理论或测量的o,p'-DDD 和o,p'-DDE 水平在一系列血脂正常和血脂异常的血浆样本中，以探索导致血浆米托坦水平高估的潜在分析问题。我们证明了对血脂异常患者米托坦测量值的高估。米托坦和o,p'-DDE 测量显示，与正常血脂血浆相比，高胆固醇血症和高甘油三酯血浆平均高估了 20%。内标p,p'-DDE 测量显示高胆固醇血症和高甘油三酯血症血浆平行减少，表明存在基质效应。最后，稀释血浆样品和/或使用磷脂去除柱可以纠正这种干扰。

　　案例展示

　　A 先生，一名 39 岁的男性，于 2007 年 7 月在我们机构转诊，接受功能性 IV 期 ACC 肺转移的治疗。他第一次就诊时的主要特征是 R0 ACC 初次切除和 Weiss 评分为 6，包括每 50 个高倍视野 (HPF) 的有丝分裂 <5。既往病史包括肥胖。在米托坦治疗的 90 个月随访期间，发现 103 份血浆米托坦水平中有 19 份 >20mg/L，包括 9 份 >30mg/L（高达 78mg/L）。使用了几种射频或细胞毒性化疗序列。根据实体瘤反应评估标准 (RECIST) 1.0 标准的最佳形态学反应是在基于吉西他滨的化疗顺序时疾病稳定。令人惊讶的是，根据美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准 v4 (NCI-CTCAE) 标准，没有观察到单级 2-4 级神经系统不良事件。在米托坦治疗 3 个月后，发现 LDL-胆固醇升高，并在 2008 年 9 月引入他汀类药物后得到解决。从 2008 年起，在评估血浆米托坦水平时进行了几次甘油三酯测量。在两条曲线之间观察到狭窄的平行度。这一观察结果使我们探索了导致血脂异常患者血浆米托坦水平高估的潜在分析问题。

　　调查

　　HCH 和 HTG 对血浆o,p'-DDD 和o,p'-DDE测量的影响

　　在常规实践中，血浆米托坦浓度通过 HPLC-UV 测定，使用p,p'-DDE 作为内标 (IS)。来自不同医院提供的血脂正常（胆固醇 <1g/L 和甘油三酯 <1g/L）和血脂异常患者的血浆样本中加入固定已知浓度的o,p'-DDD、o,p'-DDE和p,p' -DDE。米托坦及其代谢物o,p'-DDE 的浓度通过其峰表面积与已知浓度p,p'-DDE的峰表面积之比来确定。液-液萃取后，o,p′-DDD 和o,p'-DDE 测量值被确定并与已知的理论浓度进行比较。我们证明 HCH 和 HTG与理论浓度相比，导致测量的血浆米托坦水平高估（从 10% 到 75%）。o,p'-DDE的高估是相似的（从 5% 到 66%）。相比之下，用作内标的p,p'-DDE的测量浓度随着 HCH 和 HTG 量的增加而逐渐降低。

　　为了确认基质效应，首先用不含米托坦Mitotane的血脂正常的血浆稀释 HCH 和 HTG 血浆。其次，使用了 Phree 磷脂去除柱。与理论值相比，发现p,p'-DDE 值被低估，在八个具有高水平脂质的血浆样品中平均为 -21.1%。相比之下，发现 Phree 提取后分析的相同样品与理论值相似（平均值 = -2.3%）。

　　我们首次报告了血脂异常患者血浆中米托坦测量值的分析高估。从这个病例报告中，我们假设方法学问题可以解释血浆米托坦水平 >30mg/L 的血脂异常患者没有副作用。我们的研究证实米托坦和o,p当 HCH 为 3g/L 时，'-DDE 测量值被系统地高估了 10%，而当 HCH 为 6g/L 时，其测量值被系统地高估了 50%。这种高估在 HTG 血浆中类似（3.5-13.7g/L）。在临床实践中，这些结果表明胆固醇和甘油三酯浓度应与米托坦测量值一起定期分析，以提高特定患者血浆米托坦测量值的准确性。我们的结果表明，这种所谓的基质效应现象与p,p'-DDE 的提取率降低有关，是造成这种高估的原因。实际上，p,p'-DDE水平曲线下面积的减少与在o,p'-DDD 和o,p 中观察到的增加成正比'-DDE 水平并通过用不含米托坦的血脂正常的血浆稀释血浆样品或使用磷脂去除盒来标准化。最后，米托坦引起的血脂异常可能会干扰药物的肿瘤活性。事实上，赫斯科特等人。先前支持未结合脂蛋白组分的米托坦在体外更有效。

　　总之，我们证明 HCH 和/或 HTG（米托坦Mitotane的常见副作用）导致其测量值被高估，这表明应在常规实践中监测脂质变化，并应在血脂异常患者中实施优化技术。微信扫描下方二维码了解更多：