达克替尼/多泽润通过在身体的药物外排功能来增强疗效

　　近年来，我们已经证明，一些TKI的，包括拉帕替尼，阿来替尼和阿帕可通过抑制ABC转运蛋白来增强MDR癌细胞中抗癌药的功效。研究表明，TKIs可能会发展成为用于规避MDR的有用药物。达克替尼（PF299804）是临床上正在开发的口服小分子第二代表皮生长因子（EGFR）TKI，可抑制EGFR，ERBB2和ERBB4的酪氨酸激酶。在最近的一项III期研究（ARCHER 1050研究）中，与吉非替尼相比，在晚期EGFR突变的非小剂量肺癌一线治疗中，达克替尼（多泽润）的无进展生存期（PFS）显着提高了5.5个月细胞肺癌。达克替尼在许多体外癌症类型中也显示出有效的抗癌活性。

　　ATP结合盒亚家族G成员2（ABCG2）是ABC转运蛋白超家族蛋白的成员，通过将底物抗癌药物转运出癌细胞并减少其细胞内积累来介导多药耐药性（MDR）。耐多药是成功化疗的主要障碍。克服MDR的合乎逻辑的方法是抑制转运蛋白。但是，尚未在临床上批准安全有效的MDR抑制剂。

　　使用MTT测定法评估细胞的细胞毒性和MDR逆转作用。通过流式细胞术测量药物外排和细胞内药物积累。建立了H460 / MX20细胞异种移植模型，评估了达莫替尼在体内增强拓扑替康的抗癌效果。为确定达克替尼与ABCG2的底物结合位点之间的相互作用，用[125进行了I]-碘芳基叠氮吡唑嗪（IAAP）。在一系列不同浓度的达克替尼存在下，对ABCG2的钒酸盐敏感性ATPase活性进行了测定，以评估达可替尼对作为转运蛋白能量源的ATP水解的影响。基于流式细胞仪的检测和蛋白质印迹法研究了达克替尼是否可以抑制ABCG2的表达水平。通过实时定量RT-PCR分析ABCG2的mRNA表达水平。

　　在这里，我们发现达克替尼（一种不可逆的泛ErbB酪氨酸激酶抑制剂（TKI）在III期临床试验中）可以增强传统化疗药物的功效，特别是在过表达ABCG2的MDR癌细胞中，而不是在亲代敏感性细胞中。通过抑制转运蛋白的外排功能，发现达克替尼显着增加了ABCG2探针底物[阿霉素（DOX），若丹明123（Rho 123）和Hoechst 33342]的积累。此外，达可替尼刺激ABCG2 ATPase活性并与[125I] -IAAP以浓度依赖性方式对ABCG2进行光标记。但是，达克替尼在蛋白质和mRNA水平上并没有改变ABCG2的表达，也没有抑制AKT和ERK的ErbB下游信号传导。重要的是，达可替尼显着增强了拓扑替康在裸鼠中过量表达ABCG2的H460 / MX20细胞异种移植物中的功效，而不会产生额外的毒性。

　　这些结果表明，达克替尼通过抑制ABCG2外排功能并增加细胞内抗癌药的积累来逆转ABCG2介导的MDR。我们的发现提倡对达可替尼和常规化学疗法联合治疗ABCG2过表达MDR肿瘤的患者进行进一步的临床研究。更多达克替尼详情可咨询下方微信。