卡博替尼(XL184)的功能

　　卡博替尼（XL184）是一种小分子酪氨酸激酶受体抑制剂，靶向c-Met和VEGFR2。卡博替尼已获得美国食品药品监督管理局的批准，可用于治疗晚期甲状腺髓样癌和肾细胞癌。在本研究中，我们通过使对ABCG2底物抗肿瘤药具有抗性的细胞敏感，评估了卡博替尼调节ATP结合盒亚家族G成员2（ABCG2）功能的能力。我们使用药物选择的抗性细胞系H460 / MX20和三个过表达ABCG2的ABCG2稳定转染的细胞系ABCG2-482-R2，ABCG2-482-G2和ABCG2-482-T7。卡博替尼以无毒浓度（3或5μM）使过表达ABCG2的细胞对米托蒽醌，SN-38和托泊替康敏感。

　　我们的结果表明卡博替尼通过拮抗ABCG2转运蛋白的药物外排功能而不是下调其表达来逆转ABCG2介导的多药耐药性。分子对接分析表明卡博替尼与ABCG2转运蛋白的药物结合位点结合。总体而言，我们的发现表明卡博替尼抑制ABCG2转运蛋白功能，因此增强了作为ABCG2底物的抗肿瘤药的作用。卡博替尼在抗ABCG2底物药物的患者的抗癌治疗方案中可能是有用的药物。我们的发现表明卡博替尼可抑制ABCG2转运蛋白功能，从而增强作为ABCG2底物的抗肿瘤药的作用。卡博替尼在抗ABCG2底物药物的患者的抗癌治疗方案中可能是有用的药物。我们的发现表明卡博替尼可抑制ABCG2转运蛋白功能，从而增强作为ABCG2底物的抗肿瘤药的作用。卡博替尼在抗ABCG2底物药物的患者的抗癌治疗方案中可能是有用的药物。

　　我们的研究首次证明卡博替尼可以使ABCG2诱导的细胞株对底物抗癌药MX，托泊替康和SN-38产生明显的耐药性。在临床试验中，患者口服卡博替尼治疗60毫克至140毫克甲状腺髓样癌。药物动力学研究显示，患者在第19天每天接受175 mg卡博替尼的每日采集样品，结果显示血液中的Cmax为2310 ng / mL，SD值约为884 ng / mL（约2.8至6.4μM）。在我们的研究中，用作逆转剂的卡博替尼的最高浓度为5μM，这在卡博替尼的临床浓度范围内。即使有研究表明VEGFR在H460细胞中表达，但我们使用的卡博替尼剂量不足以抑制细胞增殖。卡博替尼对MDR细胞的增敏作用可能使耐药性患者受益于潜在的新型联合化疗。

　　我们的研究清楚地表明，卡博替尼可作为特异性靶向ABCG2蛋白的逆转剂。卡博替尼的最大逆转浓度为5μM，接近重复治疗后患者的卡博替尼的血药浓度。在本研究中，卡博替尼（2.5和5μM）显着降低了IC50MX，SN-38和拓扑替康的价值。为了排除引起MDR的其他因素，我们还使用了转染的细胞系HEK293 / pcDNA3.1，ABCG2-482-R2，ABCG2-482-T7和ABCG2-482-G2进行了研究。我们的MTT结果表明，5μM卡博替尼可以显着提高ABCG2底物在转染细胞中的细胞毒性作用。这些结果表明卡博替尼的逆转活性不仅限于野生型ABCG2过表达细胞系，而且还限于突变型ABCG2过表达细胞系。

　　我们还通过进行MTT分析检查了卡博替尼在逆转ABCB1介导的MDR中活性的可能性。尽管此结果与先前研究相矛盾，但我们的研究与先前研究之间的差异可能是由于利用了不同的细胞系，因为他们在其细胞中使用了HepG2 / adr和HepG2细胞学习。

　　积累研究结果表明，卡博替尼显着增加了ABCG2过表达细胞中[3H] -MX的细胞内积累。在ABCG2-482-R2，ABCG2-482-T7和ABCG2-482-G2转染的细胞中也发现[3H] -MX的细胞内积累增加。这些结果表明，卡博替尼可以在野生型和突变型ABCG2过表达细胞中增加[3H] -MX的细胞内积累。

　　由ABC转运蛋白调节剂介导的逆转机制可能是由于ABC转运蛋白的蛋白表达下调或抑制了外排功能。为了进一步研究卡博替尼逆转MDR的机制，我们进行了额外的实验，发现卡博替尼显着抑制ABCG2的外排功能。此外，蛋白质印迹结果表明卡博替尼治疗不会显着改变ABCG2蛋白的表达。免疫荧光还表明卡博替尼与对照组相比对ABCG2蛋白的转运没有明显影响。此外，卡博替尼以浓度依赖性的方式刺激ABCG2的ATPase活性，最大刺激为基础活性的2.70倍。在一起我们的研究表明，卡博替尼通过抑制转运蛋白的外排功能，使过表达ABCG2的细胞对底物抗肿瘤药明显敏感。分子对接模拟预测卡博替尼通过疏水相互作用稳定进入ABCG2的跨膜结构域。这些结果表明卡博替尼可能作为ABCG2底物竞争性抑制ABCG2。

　　总之，我们的研究表明，卡博替尼（XL184）可通过阻断转运蛋白的外排功能，显着提高过度表达ABCG2转运蛋白的细胞中MX，托泊替康和SN38等抗肿瘤药物的细胞毒性。这项研究表明，卡博替尼与常规抗肿瘤药的联合使用是克服ABCG2介导的MDR在各种类型癌症中的一种有前途的策略。微信扫描下方二维码了解更多：