奥希替尼(AZD9291)对EGFRvIII+胶质母细胞瘤的疗效

　　表皮生长因子受体变体 III (EGFRvIII) 是 EGFR 的一种活性突变形式，可在胶质母细胞瘤 (GBM) 的一个子集中驱动肿瘤生长。它存在于超过 20% 的 GBM 中，使其成为小分子靶向治疗的有希望的受体。我们假设先前测试过的 EGFR-酪氨酸激酶抑制剂 (EGFR-TKI) 如 afateninb、厄洛替尼、吉非替尼和拉帕替尼对血脑屏障的渗透性较差，导致其疗效有限。本研究在体外和体内检查了奥希替尼（以前称为 AZD9291）对 EGFRvIII+ GBM 模型的影响.因此，评估了一组六个表达 EGFRvIII+ 的 GBM 干细胞 (GSC)。EGFRvIII+GSC在EGFRvIII和其他关键基因的表达上存在差异。GSC 系 D317 表达高水平的 EGFRvIII 并具有强大的酪氨酸激酶活性，被选择用于评估奥希替尼的疗效。在此，我们报告说奥希替尼以高效力 (<100 nM) 抑制 EGFRvIII 酪氨酸激酶的组成型活性，同时还抑制其下游信号传导。此外，奥希替尼在体外和异位和原位异种移植模型中抑制 D317 的生长。需要额外的临床前研究来确定对奥希替尼最敏感的 EGFRvIII+ GBM 的分子特征。

　　我们首先确定了奥希替尼穿透无胸腺小鼠血脑屏障的程度，这是一种广泛用于癌症药物开发的临床前模型。在单次 25 mg/kg 口服剂量的三小时内，奥希替尼在小鼠大脑中积累至 3,695 ± 425 nM 的浓度，而其在血浆中的浓度仅为 314 nM。因此，在无胸腺小鼠中，奥希替尼的脑与血浆比率 > 10。奥希替尼还迅速渗透人脑，对肺癌脑转移患者有效。

　　我们接下来使用异位和原位异种移植模型确定了奥希替尼抑制 D317 GSC 生长的能力。奥希替尼治疗组的肿瘤生长明显更慢。使用基于比率的 T/C 方法分析这些数据，它测量对照 (C) 和治疗 (T) 动物中肿瘤形成的生长速率，显示 T/C 为 0.0241。这很重要，因为在该分析中，T/C < 0.4 被认为是显着的生长抑制。

　　数据显示，奥希替尼可有效减缓颅内肿瘤的生长。未治疗小鼠的中位生存期为 26 天，在奥希替尼治疗的小鼠中增加至 42 天（p<0.0001）。

　　为了确定奥希替尼是否对另一种 EGFRvIII+ GBM 有效，我们选择了 D10-0171 GSC。D10-0171 中的 EGFRvIII 酪氨酸激酶与 D317 中的一样，被高效奥希替尼抑制（IC50<100 nM）（数据未显示）。此外，奥希替尼在皮下模型中抑制 D10-0171 的生长，但效果不大（T/C 为 0.1669）。

　　本研究证实了先前关于奥希替尼有效穿透血脑屏障的报道。对一组六个 EGFRvIII+ GBM 的评估揭示了 EGFRvIII 的表达和 EGFRvIII 酪氨酸激酶活性程度的异质性。奥希替尼对 EGFRvIII 高表达和强 EGFRvIII 酪氨酸激酶活性的 EGFRvIII+ GBM 的疗效评估表明，奥希替尼可有效抑制这些肿瘤的生长。奥希替尼是否对 EGFRvIII 表达较低和 EGFRvIII 酪氨酸激酶活性较低的 EGFRvIII+ GBM 有效仍有待确定。

　　这里提供的体外和体内数据证明了奥希替尼抑制具有高 EGFRvIII 酪氨酸激酶活性的 EGFRvIII+ GBM 生长的能力。奥希替尼的这种能力基于几个关键特性。首先，它可以很好地穿透血脑屏障。虽然我们的研究是针对小鼠进行的，但其他地方已经证明奥希替尼也可以穿透人脑。其次，奥希替尼是 EGFR 酪氨酸激酶的不可逆抑制剂，因此其对 EGFRvIII 信号的抑制作用是持久的。第三，奥希替尼抑制 EGFRvIII+ GBM 中涉及癌症生长的多种细胞内途径。这些数据表明，对于 GBM 患者，奥希替尼可能是比先前测试的 EGFR-TKI 更好的候选药物。

　　本研究中的一个重要观察结果是 EGFRvIII+ GBM 在 EGFRvIII 的表达、EGFRvIII 酪氨酸激酶活性的程度以及其他几个关键基因的表达方面是异质的。据我们所知，之前的临床试验没有考虑 EGFRvIII+ GBM 的异质性。例如，失败的 EGFRvIII 疫苗试验包括所有 EGFRvIII+ GBM 患者。我们建议未来涉及 EGFRvIII+ GBM 患者的临床试验应将患者分为至少三组：1) EGFRvIII 酪氨酸激酶组成型活性高的组，2) EGFRvIII 酪氨酸激酶组成型活性低的组，以及 3) EGFRvIII 的酪氨酸激酶活性的组成型活性可忽略不计的一组。

　　总之，我们的研究表明，奥希替尼可有效穿透血脑屏障并抑制具有较高 EGFRvIII 酪氨酸激酶活性的 EGFRvIII+ GBM 的生长。需要额外的临床前研究来确定可能使这些肿瘤对奥希替尼敏感的 EGFRvIII+ GBM 的分子特征。微信扫描下方二维码了解更多：