劳拉替尼(Lorlatinib)耐药原因

　　劳拉替尼（Lorlatinib）最近获得 FDA 批准，是克唑替尼和第二代 ALK 抑制剂或色瑞替尼或艾乐替尼前期治疗后进展的患者的新标准治疗方法，也是最后一个可用的 ALK 靶向治疗线。通过这项研究，我们通过深度分子分析和 PDX 和细胞系的发展对肿瘤活检和 ctDNA 的纵向评估，有助于了解驱动对这种靶向药物产生抗性的适应性机制。

　　Yoda 及其同事最近描述了在ALK激酶结构域的单个等位基因上突变的连续累积可介导约 35% 先前暴露于第一代和第二代 TKI 的患者的耐药性。除了这些关键发现之外，我们还鉴定并表征了来自患者肿瘤活检组织的三种新型复合突变（F1174L/G1202R、L1196M/D1203N 和 C1156Y/G1269A）。C1156Y/G1269A 复合突变在 Ba/F3 细胞和患者来源的细胞系中均保持对劳拉替尼的敏感性，这表明即使存在复合突变，同时发生的脱靶耐药机制也可以推动疾病进展。与之前描述的 L1196M/G1202R 突变类似，L1196M/D1203N 突变赋予了高水平的劳拉替尼耐药性。另一方面，与单一 G1202R 突变相比，G1202R/F1174L 复合突变导致对劳拉替尼的耐药性轻度增加，并且有可能通过增加体外劳拉替尼剂量成为靶向.然而，由于毒性增加的风险，这种方法在患者中不可行。最近的一项研究进一步支持了这一点，该研究报告了G1202R 突变 Ba/F3 细胞在体外获得 F1174L 突变，使用 ENU 诱变筛选暴露于低剂量劳拉替尼，对这种药物产生低水平的耐药性。在该患者中，ctDNA 检测到多个继发性 ALK 突变，其中 G1202R 和 S1206F 被证实为顺式，表明复合突变可能是多克隆事件。

　　我们对源自患者的细胞系的研究允许进一步探索对劳拉替尼耐药的脱靶机制，有助于过去在设计新治疗策略方面的努力。我们开发了两种源自患者的细胞系，这些细胞系在使用涉及 SRC 激活的劳拉替尼治疗时进行了体外EMT。EMT先前已暗示在抗ALK抑制剂和在肺癌其他靶向疗法。此外，众所周知，SRC 激活在不同癌症类型的 EMT 发展中起着关键作用。Crystal 及其同事此前曾报道，几种 ALK 耐药的患者来源细胞系对 ALK 和 SRC 联合抑制作用敏感。在本研究中，我们进一步证明这种关联在接受 EMT 的劳拉替尼耐药患者衍生细胞系中非常有效，并表明 SRC 抑制可以部分恢复间充质细胞中 E-钙粘蛋白的表达，而不会完全将它们恢复到上皮表型。有趣的是，正如最近针对 EGFR 突变 NSCLC 所显示的那样，FGFR 抑制剂在体外使 ALK 重排的 EMT 细胞系对劳拉替尼敏感（17）。目前尚无针对接受 EMT 的肺癌的有效疗法，我们的工作进一步支持在具有脱靶耐药机制的患者的临床试验中探索联合策略。

　　最后，我们将 NF2 功能丧失确定为对劳拉替尼（Lorlatinib）耐药的一种新型旁路机制，随后通过H3122 细胞系中的NF2敲除在体外证实了这些发现。在这种情况下，NF2 剪接位点突变在进展为克唑替尼时存在，在这种情况下，患者对劳拉替尼治疗有初步反应。在抵抗时，NF2 中发生了额外的有害事件，并导致了有效的旁路机制。我们假设 NF2 功能丧失是多个转移位点之间的功能融合，其中连续基因组事件导致双等位基因NF2有害的突变。患者来源的细胞系对劳拉替尼具有抗性，并通过体外和体内的 mTOR 抑制致敏，构成了这种情况下一种新的潜在治疗方法。微信扫描下方二维码了解更多：