卡博替尼Cabometyx可在结直肠中发挥有效的抗肿瘤作用

　　我们先前证明卡博替尼（Cabometyx）可在结直肠PDX模型中发挥有效的抗肿瘤作用。10个CRC外植体中有7个显示出显着的抗肿瘤作用，而9个卡博替尼敏感的CRC外植体中有5个显示出肿瘤消退。在这项研究中，使用雷戈非尼（FDA批准用于抗药性晚期大肠癌）作为比较剂，我们显示卡波替尼在CRC PDX模型中抑制肿瘤生长方面具有优势，并且机理研究表明卡博替尼在该模型中具有独特的药效学作用。10种CRC外植体中只有1种CRC036表现出了瑞格非尼抗肿瘤作用增强的趋势。选择用于PDX模型的剂量，以估算血浆药物在人体可达到的药效学范围内的暴露程度。

　　临床前研究已经证明MET在促进抗VEGF治疗的抗性。与VEGF激活一样，已证明MET信号传导是内皮血管生成的有效诱导剂。虽然尚不知道MET和VEGF受体家族会相互作用或彼此磷酸化，但这些激酶可协同激活类似的下游中间体，包括FAK，MAPK和AKT。来自临床前研究的数据还显示，MET激活通过其他常见的信号传导中间物（例如，包含SRC同源2域的蛋白质（SHCs））促进血管生成。体内和体外研究表明，通过抑制MET可以减少血管生成，从而导致细胞凋亡。在这项研究中，显示出卡博替由DCE-MRI中，已经显示出与肿瘤血管相关，并在临床前和临床研究（血管发生的技术测量相比regorafenib在肿瘤血管一个显著减少。尽管卡博替尼和雷戈非尼都通过VEGFR2抑制具有抗血管生成特性，但双重MET和VEGFR2双重抑制可能解释了观察到的在肿瘤血管形成方面的治疗效果差异。此外，卡博替尼还可以更大程度地观察到血管生成介质VEGFR2和TIE2的蛋白质表达几乎立即持续下降。

　　在组成型活化的MET激酶细胞系中也显示出卡波替尼的增强的抗肿瘤作用。通过HGF MET的生理活化配体结合引起下游信号传导的复杂网络，影响细胞周期调节，细胞存活和细胞迁移和粘附主要是通过PI3K / AKT / mTOR的，SRC，和RAS / MEK途径。暴露于抗VEGF治疗后异常的MET激活导致获得性耐药，并导致负责细胞存活，血管生成和EMT的串扰通路上调。除降低VEGFR2和TIE2的水平以及肿瘤血管形成外，通路分析还显示，卡博替尼治疗可显着降低PI3K / AKT / mTOR通路中涉及的许多成分，包括PI3K，PDK1，AKT，mTOR，Rictor，Raptor和S6K1 / 2。观察到的肿瘤血管减少以及MET，RET和AXL激活均降低，这表明对多种串扰通路的抑制作用可能会消除其他抗VEGF治疗所观察到的获得性耐药。

　　该PI3K / AKT / mTOR途径调节通过多个下游靶，包括低氧诱导因子1细胞代谢（HIF-1），其参与葡萄糖代谢，和ULK-1，这是参与自体吞噬。PI3K / AKT / mTOR途径的抑制导致葡萄糖摄取的破坏。卡博替尼治疗证实了这一点，PI3K / AKT / mTOR介质的显着降低和葡萄糖摄取均通过[18观察到F] -FDG-PET。相反，雷戈非尼治疗后葡萄糖摄取的变化没有明显改变。进一步的研究表明，与基线相比，卡博替尼治疗的丙酮酸代谢和TCA周期的基因分析显着降低，这在雷戈非尼治疗后也未观察到。这些改变表明PI3K / AKT / mTOR途径的抑制导致卡博替尼治疗的葡萄糖代谢降低和糖酵解抑制。

　　葡萄糖剥夺和PI3K / AKT / mTOR途径的抑制先前已经显示出诱导在临床前研究。与基线相比，卡博替尼治疗期间自噬中包括ATG3，LC3和beclin1在内的关键酶的蛋白质表达增加。瑞格非尼治疗后未观察到这些变化。在正常情况下，自噬的基础水平通常较低，并且被限制于维持重要的细胞功能。然而，在营养缺乏和缺氧条件下，自噬被上调以促进代谢稳态和细胞存活。该PI3K / AKT / mTOR途径的自噬增强的药理学抑制通过抑制的ULK1复杂的mTOR介导的活化，导致对ATP能量细胞组分的后续溶酶体降解。伴随糖酵解抑制和自噬相关成分的上调，在HCT116和HT29 CRC细胞系中进行卡博替尼治疗期间自噬增加。使用自噬检测试剂盒，在体外观察到明显的自噬诱导卡博替尼24小时后与雷戈非尼和对照组比较。这些结果进一步支持了卡博替尼的多激酶抑制，特别是通过MET抑制的PI3K / AKT / mTOR途径，引发了从糖酵解依赖到自噬依赖的代谢转变，作为持续细胞存活的一种手段。

　　这些发现与先前发表的数据表明自噬是自噬是获得对某些抗癌疗法的耐药性的机制相一致的。体外打击使用抗自噬剂SBI-0206965，ULK1抑制剂或氯喹加卡博替尼的联合治疗效果显着增加了凋亡标记胱天蛋白酶3/7荧光检测。瑞戈非尼与这些抗自噬药合用未显示caspase 3/7活性增加。尽管克唑替尼是一种有效的MET抑制剂，与卡波替尼相比，产生的MET抑制作用相似，但当将SBI-020695添加到克唑替尼时，自噬并没有增加。这些发现表明，存在多种串扰途径，在存在MET抑制作用的情况下，可以进行持续的糖酵解。然而，如卡博替尼所见，多种激酶抑制作用中断了作为持续糖酵解的逃逸机制的串扰，并导致了自噬的诱导。

　　我们的结果表明，卡博替尼在体外和体内均具有比雷戈非尼更高的抗肿瘤作用使用CRC外植模型。通过抑制包括PI3K / AKT / mTOR在内的多个串扰通路，MET和VEGFR2的双重抑制作用协同发挥作用，增强抗血管生成反应。多种激酶途径的抑制产生从糖酵解到自噬的新陈代谢变化，作为卡博替尼治疗期间获得性耐药和细胞存活的方法。卡博替尼与抗自噬剂的组合可增加HCT116和HT29 CRC细胞系的凋亡。这些发现需要进一步研究卡博替尼在CRC和靶向自噬的联合方法中的应用。目前正在开发一项临床试验，以研究卡巴替尼在难治性mCRC患者中的疗效。现在卡博替尼的仿制药价格是多少？更多详情可咨询下方微信。