曲美替尼(Trametinib)对结肠癌细胞的细胞毒性

　　ERRα 是一种调节能量代谢的组成型转录因子，在各种肿瘤的进展中起着重要作用。然而，它在细胞存活和增殖中的作用及其在结肠癌靶向治疗中的意义仍然难以捉摸。采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测结肠癌组织和细胞系中ERRα的表达。进行伤口愈合试验和 transwell 试验以检查结肠癌细胞的迁移和侵袭。采用细胞活力测定、克隆形成测定、蛋白质印迹测定和双荧光素酶报告基因测定来研究曲美替尼（trametinib，MEK 抑制剂）和 EGF 治疗之间的相互作用。流式细胞术、蛋白质印迹、定量逆转录聚合酶链反应和异种移植研究用于确定曲美替尼和辛伐他汀的组合是否具有协同作用。

　　结果

　　ERRα正调控结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭，抑制ERRα完全降低了EGF治疗诱导的结肠癌细胞增殖。进一步研究表明，曲美替尼部分抑制了 EGF 治疗诱导的 ERRα 上调，ERRα 抑制增加了结肠癌细胞对曲美替尼（trametinib）的敏感性。最后，我们将曲美替尼与新报道的具有抑制ERRα转录活性功能的临床常用药物辛伐他汀联合使用，发现这种联合在体外抑制结肠癌细胞增殖和存活方面产生了协同作用。体内。

　　结论

　　目前的数据表明，ERRα 在结肠癌细胞中充当致癌基因，ERRα 和 MEK 的联合靶向可能是一种有前景的结肠癌治疗策略。

　　结肠癌是这个词中第三常见和第二致命的恶性肿瘤。化疗和靶向治疗仍然是治疗转移性结肠癌的关键策略。然而，由于该突变和EGFR / RAS / BRAF，EGFR的异常活化的过表达/ RAS通路经常在结肠癌发生，并且与不良预后和耐药性有关。

　　EGFR在结肠癌细胞的增殖和分化过程中起关键作用。激活的 EGFR 组成性激活多个下游通路，包括 RAS/MEK/ERK（MAPK-细胞外信号调节激酶）和 AKT/PI3K/mTOR 通路。多种靶向药物，包括西妥昔单抗、贝伐单抗和瑞戈非尼，广泛用于结肠癌，并参与靶向EGFR信号分子。然而，它们的影响仍然有限。许多临床前治疗策略已经开发了EGFR途径抑制剂与其它靶向药物在BRAF / KRAS突变体结肠癌组合。然而，由于安全问题或缺乏客观反应，这些都没有被批准用于临床。因此，我们迫切需要开发更强大的结肠癌治疗方法。

　　曲美替尼（Trametinib）是一种高度特异性且有效的 MEK1/2 抑制剂，已获得美国食品药品监督管理局 (FDA) 的批准，用于治疗 BRAF 突变的转移性黑色素瘤。BRAF 和 MEK 的双重抑制作用在转移性 BRAFV600E 结肠癌患者中进行了测试，但效果很小。

　　孤儿核激素受体，雌激素相关受体 A (ERRα, NR3B1)，是一种在结构和功能上与经典雌激素受体相关的组成型转录因子。它与 SRC 和 PGC-1 共激活剂家族的成员相互作用并受其调节。此外，ERRα的靶基因包括其自身的基因ESRRA ，并将其在线粒体生物发生和能量代谢。ERRα在各种肿瘤的致癌作用中起重要作用。ERRα 的高表达与结肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌、乳腺癌和前列腺癌的不良预后相关。以往的研究表明，ERRα的表达在结肠癌患者中显着上调。此外，ERRα 还促进细胞迁移和侵袭，并通过结肠癌细胞的能量代谢控制增殖和致瘤能力。这些发现表明 ERRα 可能是结肠癌进展的潜在生物标志物。

　　先前的报告显示，EGFR 通路与 ERRα 信号传导之间存在一些联系。MEK/MAPK和PI3K/Akt信号通路通过增加ERRα调节ERRα转录活性并促进乳腺癌细胞的恶性行为，而ERRα的过表达也负向调节ERK活化。ERRα 和 EGFR 之间的这种相互作用表明 ERRα 在 EGF 介导的结肠癌细胞存活和增殖中具有潜在的新功能。因此，靶向 ERRα 可能是一种潜在的新治疗策略，可提高结肠癌细胞中 EGFR 信号抑制的效率。

　　在本报告中，我们表明抑制 ERRα 完全降低了结肠癌细胞中 EGF 治疗诱导的细胞增殖和存活。此外，我们发现曲美替尼部分抑制了 EGF 暴露诱导的 ERRα 上调，ERRα 的抑制增加了结肠癌细胞对曲美替尼的敏感性。最后，我们将曲美替尼与临床常用的辛伐他汀联合使用，新报道的辛伐他汀具有抑制ERRα转录活性的功能，结果表明该联合在体外协同抑制增殖和集落形成。以及结肠癌细胞的体内致瘤能力。微信扫描下方二维码了解更多：