治疗和预防来那替尼(neratinib)引起的腹泻的新靶点

　　腹泻是血液疗法和靶向癌症疗法（例如酪氨酸激酶抑制剂 (TKI)）常报告的不良反应之一，通常会显着影响患者的生活质量、发病率和死亡率。来那替尼（neratinib）是一种口服、不可逆的泛 HER 酪氨酸激酶抑制剂，在 HER2 阳性乳腺癌中具有临床活性。腹泻是这种强效抗癌药物最常见的副作用，造成这种副作用的原因尚不清楚。我们最近表明钙敏感受体 (CaSR) 的激活可以抑制结肠中促分泌素引起的腹泻，因此我们假设 CaSR 激活也可以减轻来那替尼引起的腹泻。使用已建立的离体肠段离体模型，我们研究了来那替尼诱导的液体分泌和 CaSR 激活减少分泌的能力。

　　在我们的研究中，获取大鼠肠道的各个部分（近端、中端、远端小肠和结肠），并在腔内灌注不同浓度的来那替尼（10、50、100 nmol L-1)。在第二组比较实验中，在来那替尼暴露前和暴露期间调节腔内钙浓度（从 1.0 到 5.0 或 7.0 mmol L-1）。在独立的系列实验 R-568 中，使用已知的拟钙剂 CaSR 活化，并将效果与升高的 Ca2+浓度（5.0 和 7.0 mmol L-1）进行比较。因此，Ca2+浓度升高（5.0 和 7.0 mmol L-1）或 R-568 的CaSR 激活以剂量依赖性方式显着降低了来那替尼诱导的液体分泌。预先暴露于升高的管腔钙溶液（5.0 和 7.0 mmol L-1) 还阻止了来那替尼诱导的液体分泌。总之，暴露于 luminal neratinib 导致大鼠肠道中液体分泌的显着升高。增加管腔钙以剂量依赖性方式抑制来那替尼相关的液体分泌。这些结果表明 CaSR 激活可能是减少化疗相关腹泻的有效治疗靶点。

　　来那替尼（PB-272；也称为 HKI-272，Nerlynx™）是一种口服抗癌药物，对 HER2 阳性乳腺癌具有临床活性，是美国 FDA 批准用于早期延长辅助治疗的首个抗癌药物。曲妥珠单抗治疗后的此类癌症。来那替尼的作用机制在最近的文献中得到了很好的研究和描述。该药物是一种有效的、小分子的、不可逆的人表皮生长因子受体（EGFR，也称为 HER-1、ErbB-1）、HER2（neu、ErbB-2）和 HER4（ ErbB-4)。

　　虽然来那替尼有一个显著临床抗癌效果，它也有腹泻的常见的副作用，88％-91％的病人有报道腹泻症状，特别是40％-grade 3，和<1％4 -grade 。 在 4 级患者中，需要紧急干预，包括住院，显着降低生活质量并增加死亡率。

　　TKI 等靶向疗法在癌症患者中显示出有希望的临床疗效，但是，该疗法的副作用在某些情况下可能会导致可能导致停止治疗的不良症状。化疗或某些 TKIs（如来那替尼）的一个非常常见的不良反应是腹泻，这会导致液体和电解质的大量流失，并且在严重的情况下还会由于加速转运而导致营养吸收不良沿着肠道的时间。

　　在本研究中，我们调查了在暴露于来那替尼（neratinib）之前同时或预防性地激活 CaSR 是否可以减少体液和电解质的流失，这将使患者在服用该药物时提高生活质量。

　　1.分离的肠段和液体分泌

　　由于小肠起着液体和电解质平衡中起重要作用，我们希望如果腹泻先前报道的副作用是有联系的有在小肠的直接行动来那替尼先调查。最近，我们的团队开发了一种隔离灌注系统，使我们能够在对管腔内容物进行采样的同时观察近端、中端和远端小肠。体外分离肠段的能力使我们能够测量体液分泌，这一直是我们实验室各种研究的重点。在这些研究中，我们发现通过使用含有 FITC-菊粉的腔内灌注液，我们可以实时测量肠道所有部分的液体分泌或吸收率。此外，还可以通过对浴灌流液进行采样以获得可检测的 FITC-菊粉荧光来控制组织的泄漏或降解。

　　2.来那替尼对小肠液体分泌的影响

　　在这些研究中，我们检查并证实了在管腔中暴露于来那替尼导致小肠近端、中段和远端的液体分泌呈剂量依赖性增加。这种液体分泌的增加发生在暴露于该试剂的 15 分钟内，并导致液体分泌进一步增加，直到在暴露 60 分钟时达到最大水平，然后维持该水平。这些结果显示了该试剂对肠段的有趣影响。由于体液分泌水平增加，这不仅会导致体液流失，还可能导致电解质吸收减少。

　　3.来那替尼对结肠液分泌的影响

　　根据我们在小肠中的观察，我们希望检查来那替尼是否也增加了结肠中的液体分泌，以及这种药物是否具有类似的特征，在引入结肠腔灌注液后影响液体和电解质的稳态。当来那替尼在结肠腔内灌注时，我们看到了与小肠中发生的情况类似的情况，即在接触药物后 15 分钟内开始增加液体分泌，并持续升高分泌水平，直到最大60 分钟时达到水平。

　　4.通过 CaSR 激活调节来那替尼诱导的结肠液体分泌

　　结肠中 CaSR 激活的影响由我们的实验室很好地定义了促分泌素引起的腹泻。在这一系列实验中，数据表明，提高口服 Ca2+将对整个肠道和结肠产生保护作用，从而在服药期间防止相关的腹泻。这个有希望的观察现在提供了一种几乎没有副作用的营养疗法，可以在化疗周期的任何时候使用。

　　5.来那替尼暴露前 CaSR 激活的记忆效应

　　另一个问题是 Ca2+的有益作用是否可以在来那替尼之前给予，并且仍然保持肠道中的保护性抗分泌作用。我们在研究中能够证明暴露于升高的 Ca2+溶液15 分钟足以在 Ca2+浓度恢复到降低的水平并添加来那替尼时维持抗分泌作用。这一观察结果表明，对 CaSR 的短暂刺激可以提供“记忆效应”，从而使肠道暂时对来那替尼引起的腹泻产生抵抗力。这是一个重要的发现，因为它表明预防性剂量的 Ca2+继之以来那替尼和 Ca2+可以提供甚至更完全的预防。

　　6.R-568（拟钙剂）对来那替尼诱导的小肠和结肠液体分泌的影响

　　为了提供 CaSR 激活对大鼠肠道和结肠分泌吸收功能影响的额外证据，我们使用了 R-568，一种小分子拟钙剂。该数据表明，腔内暴露于升高的 Ca2+浓度或具有正常 Ca2+浓度的R-568 会激活 CaSR，并对减少来那替尼诱导的液体分泌具有类似的影响。

　　最后，这些发现表明，钙对 CaSR 的激活可以减轻与来那替尼暴露相关的药物引起的腹泻，并减轻液体和电解质快速流失的副作用。口服 Ca2+与来那替尼疗法的预防性和急性给药都为改善患者预后提供了新的重要机会。微信扫描下方二维码了解更多：