达克替尼Dacomitinib怎么增强常规化疗药物的疗效

　　背景：ATP结合盒亚家族G成员2（ABCG2）是ABC转运蛋白超家族蛋白的成员，通过将底物抗癌药物转运出癌细胞并减少其细胞内蓄积来介导多药耐药性（MDR）。耐多药是成功化疗的主要障碍。克服MDR的合乎逻辑的方法是抑制转运蛋白。但是，尚未在临床上批准安全有效的MDR抑制剂。　

　　方法：采用MTT法评估细胞的细胞毒性和逆转MDR的作用。通过流式细胞术测量药物外排和细胞内药物积累。建立H460/MX20细胞异种移植模型以评估达克替尼(Dacomitinib)在体内对拓扑替康的抗癌功效的增强。为确定达克替尼(Dacomitinib)与ABCG2的底物结合位点之间的相互作用，用[125进行了I]-碘芳基叠氮吡唑嗪（IAAP）。在一系列不同浓度的达科替尼存在下，测量ABCG2的钒酸盐敏感性ATPase活性，以评估达克替尼(Dacomitinib)对作为转运蛋白能源的ATP水解的影响。　　

　　基于流式细胞仪的检测和蛋白质印迹法研究了达克替尼(Dacomitinib)是否可以抑制ABCG2的表达水平。通过实时定量RT-PCR分析ABCG2的mRNA表达水平。通过Western印迹检测AKT，ERK的蛋白表达水平及其磷酸化。　　

　　结果：在这里，我们发现达克替尼(Dacomitinib)是一种不可逆的泛ErbB酪氨酸激酶抑制剂（TKI），处于III期临床试验中，可以增强传统化疗药物的功效，特别是在过表达ABCG2的MDR癌细胞中，而不是在亲代敏感性细胞中。通过抑制转运蛋白的外排功能，发现达克替尼(Dacomitinib)显着增加了ABCG2探针底物[阿霉素（DOX），若丹明123（Rho123）和Hoechst33342]的积累。　　

　　此外，达克替尼(Dacomitinib)刺激ABCG2ATPase活性并与[125I]-IAAP以浓度依赖性方式对ABCG2进行光标记。但是，达克替尼(Dacomitinib)在蛋白质和mRNA水平上并没有改变ABCG2的表达，也没有抑制AKT和ERK的ErbB下游信号传导。重要的是，达克替尼(Dacomitinib)显着增强了拓扑替康在裸鼠中过量表达ABCG2的H460/MX20细胞异种移植物中的功效，而不会产生额外的毒性。　　

　　结论：这些结果表明达克替尼(Dacomitinib)可通过抑制ABCG2外排功能并增加抗癌药的细胞内蓄积来逆转ABCG2介导的MDR。我们的发现提倡对达可替尼和常规化学疗法联合治疗ABCG2过表达MDR肿瘤的患者进行进一步的临床研究。