达拉非尼dabrafenib可能影响其他分子途径

　　已知许多人类激酶的激酶结构域之间存在大量相似之处。最近有研究表明，RIPK1和RIPK3的激酶结构域与B-RAF的激酶结构域具有高度的序列相似性。这种相似性表明，抑制致癌激酶B-RAF的抑制剂也可能抑制RIPK1和/或RIPK3的激酶活性。事实上，之前的研究已经报道了B-RAF抑制剂，如fda批准的抗癌药物dabrafenib、vemurafenib和sorafenib，可以阻断RIPK3。　　

　　有趣的是，有报道称B-RAFV600E抑制剂dabrafenib在体外选择性地抑制RIPK3，并降低RIPK3介导的多种类型细胞的MLKL磷酸化。此外，达拉非尼可以破坏RIPK3和MLKL之间的相互作用，从而减少对乙酰氨基酚诱导的肝损伤模型的坏死。同样，达拉非尼也抑制了ripk3介导的MLKL磷酸化，并减少了中毒性表皮坏死松解模型的皮肤病变坏死。　　

　　这些数据表明，达拉非尼可能是治疗ripk3介导的坏死相关疾病的有效药物。我们之前报道过，损伤部位RIPK3表达上调，坏死细胞死亡导致脊髓损伤后继发性神经组织损伤。　　

　　在目前的研究中，我们进一步证明了达拉非尼在SCI模型中可以抑制ripk3依赖性的细胞死亡。重要的是，达拉非尼治疗显著降低了受损脊髓中RIPK3和pMLKL的表达。此外，达拉非尼可显著减少脊髓损伤后3天pi阳性细胞的数量。综上所述，这些结果表明，B-RAFV600E抑制剂达拉非尼抑制了RIPK3-MLKL信号通路，从而防止了脊髓损伤后受损神经组织中的坏死细胞死亡。　　

　　已有研究表明，坏死与中枢神经系统疾病和创伤的病理有关。因此，抑制坏死可能改善中枢神经系统的病理状况。我们之前报道过，SCI后的RIPK3表达上调开始于24小时，在3天达到峰值，并持续21天。RIPK3表达的时间过程与脊髓损伤后继发性损伤非常相似。我们前期的研究也发现，在脊髓损伤后受损神经组织的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞中RIPK3的表达增加，提示损伤脊髓的各种神经细胞都可以发生坏死。　

　　这些观察结果表明，ripk3介导的坏死可能与继发性损伤的不同病理机制有关，如神经元损伤、轴索变性和脱髓鞘。有趣的是，在目前的研究中，我们发现达拉非尼可以预防ripk3介导的坏死，从而减轻脊髓损伤后的神经元损失。此外，接受达拉非尼治疗的动物脊髓脱髓鞘和轴突损伤明显减少。这些发现表明达拉非尼治疗可预防不同类型的神经细胞坏死，从而提供一种神经保护作用，改善脊髓损伤后的各种病理状况。　　

　　许多研究表明，抑制坏死可以改善各种疾病模型的功能结果。在心肌梗死模型中，坏死抑制素-1减少坏死细胞死亡和梗死面积，并保持心脏功能。在肾缺血再灌注损伤模型中，抑制坏死减少器官损伤，改善肾功能。坏死抑制素-1保护大鼠视网膜脱离后的细胞死亡和改善功能结果。在中枢神经系统损伤模型中，坏死性抑制素-1可减少坏死性细胞死亡和脑组织损伤，改善创伤性脑损伤后的空间记忆和运动功能。此外，特定的化学抑制剂或基因敲低对RIPK1的抑制也可减轻脑出血后继发性脑损伤。　　

　　最近，一些研究表明，坏死可以影响脊髓损伤后的运动功能。重要的是，本研究首次证明，达拉非尼治疗可减少ripk3介导的坏死，这种坏死可导致继发性损伤，并改善脊髓损伤后运动和感觉功能的恢复。MEPs的电生理数据表明，达拉非尼处理小鼠的运动恢复明显增强。　　

　　此外，达拉非尼显著降低了感觉功能障碍，如机械和热过敏。这些结果表明达拉非尼具有促进脊髓损伤后功能恢复的治疗潜力。这些改善可能是由于达拉非尼减少了继发性神经组织损伤，如神经元丢失、轴索损伤和脱髓鞘的治疗效果。　　

　　对已经被FDA批准的化合物进行药物重新定位对新药的开发有好处。人们对药物再利用的兴趣越来越大，因为新药的开发和批准是一个昂贵和苛刻的过程，同时也有很高的失败风险。药物再利用的优势在于，开发轨道可以避免临床前数据无法预测的意外失败，例如由于毒性。此外，新的候选疗法可以很快准备好进行临床试验。　　

　　B-RAFV600E抑制剂dabrafenib已经进行了临床试验，并已获fda批准用于治疗黑色素瘤和其他人类疾病。近年来，越来越多的证据表明多靶向激酶抑制剂，包括dabrafenib和vemurafenib，作为抗癌药物，也有抗坏死性作用。值得注意的是，达拉非尼作为RIPK3抑制剂的功能是通过药物重新定位方法检测的。前期研究也证实了达拉非尼在体内外多种疾病模型中都能选择性抑制RIPK3。本研究结果证实B-RAFV600E抑制剂dabrafenib确实抑制ripk3介导的损伤脊髓坏死，并发挥神经保护作用。因此，本研究表明，达拉非尼可能是治疗人类脊髓损伤的一种有前途的候选药物。　　

　　目前的研究有几个局限性。首先，目前的研究没有进行体外分析来证实达拉非尼对脊髓神经元或其他神经元细胞的生物学作用。之前的几项研究表明，达拉非尼在体外对人黑色素瘤细胞、人真皮成纤维细胞、人结肠癌细胞和白血病细胞的研究表明，达拉非尼实际上抑制了ripk3介导的MLKL磷酸化。　

　　然而，达拉非尼治疗各种来自脊髓的神经元细胞的实际分子机制仍有待充分阐明。其次，达拉非尼可能影响其他分子途径，以调节脊髓损伤后的神经组织损伤和功能结果。因此，有必要确认另一个缺乏RIPK3的SCI模型(如RIPK3敲除)确实削弱了达拉非尼介导的RIPK3介导的坏死衰减。此外，最近的研究表明，达拉非尼dabrafenib可降低炎症标志物(包括TNF-α)的上调。这些研究表明，达拉非尼可能抑制损伤脊髓中TNF-α的上调，从而减弱RIPK3-MLKL信号通路。详情请扫码咨询：