艾曲波帕/艾曲博帕允许正常MK菌落的形成

　　在《haematots》中，DiBuduo等人指出，艾曲波帕通过激活STAT、AKT和ERK通路，在体外和体外诱导人类巨核生成，这与其他类似血栓的romiplostim不同。　　

　　巨核生成是导致血液中产生血小板的过程，从骨髓祖细胞分化为血小板前体，称为巨核细胞(MKs)。这一现象涉及到多功能造血干细胞(HSC)向MK祖细胞的转化。这一祖细胞通过经典的有丝分裂经历数次分裂，进一步成熟涉及两种独特的生物学机制:通过称为内膜分裂的过程进行多倍体化，以及MK细胞质碎裂产生血小板。这一过程受到许多转录因子的高度调控，包括gata/2、fog1、RUNX1、FLI1、SCL、GFI1b、NFE2和MYB，以及许多外部因素，如细胞因子、趋化因子和细胞外基质成分。　　

　　血小板生成素(TPO)是调节巨核生成的主要细胞因子。TPO与I型同型二聚体受体MPL的胞外结构域结合，主要与两个残基D261和L265结合，也与F104残基周围的一个位点结合，F104是先天性巨核细胞血小板减少症突变的。TPO结合导致受体构象的改变，导致预相关JAK2分子的激活。随着受体的转磷酸化，下游信号分子，包括STAT，ERK和PI3K，被激活。MPL和JAK2的表达从HSC到MK，在MK分化过程中逐渐增加。因此，TPO/MPL轴不仅控制巨核的生成，也控制造血干细胞的稳态。的确，c-mpl−/−小鼠存在HSC功能缺陷和血小板减少　　

　　TPO/MPL/JAK2轴缺陷通过抑制巨核生成过程导致血小板减少或全血细胞减少等血液病。或者，血小板减少状态可能发生在化疗和免疫或感染性疾病。为了克服血小板减少症，已经开发了几种TPO模拟药物，包括romiplostim(安进)和艾曲波帕(诺华)。Romiplostim是一种以竞争方式结合MPL的TPO模拟物，由两个相同的单链亚基组成，由人类IgG1Fc连接到一个包含两个MPL结合域的肽。相比，艾曲波帕non-peptideTPO模拟，结合跨膜域的人类MPL关键H499残留，这不是保守的鼠标Mpl.8这两个化合物已通过美国食品和药物管理局(FDA)和欧洲药品局(EMA)提高血小板计数在免疫性血小板减少性紫癜(ITP)和丙型肝炎病毒感染引起的。　　

　　通过TPO模拟物刺激TPO/MPL轴也已成功应用于遗传性MYH9相关的血小板减少症和再生障碍性贫血，其中艾曲波帕显示了基于多血统临床反应的好处。romiplostim和艾曲波帕治疗骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)的效果已经被研究。在治疗中使用艾曲波帕的临床效益非常有限；血小板计数没有明显改善，但出血次数有所减少。此外，在骨髓和外周血中发现，接受艾曲波帕与安慰剂的患者恶性细胞的比例没有差异。其他研究表明，艾曲波帕允许正常MK菌落的形成，并对白血病细胞增殖有很强的抑制作用。　　

　　艾曲波帕与MPL的结合是人类和其他灵长类动物特有的。然而，它可以通过一个mpl独立的途径，通过调节细胞内铁含量来影响小鼠和人类白血病细胞的增殖。总之，这些研究表明了TPO模拟在调控造血干细胞稳态和巨核形成中的重要性。埃尔隆柏格是一种口服药物，因此易于使用，而罗米普罗斯汀应皮下注射。然而，艾曲波帕的作用机制尚不完全清楚，因为还不能在临床前小鼠模型中进行研究。　

　　在他们的工作中，DiBuduo等人使用传统的体外培养系统与人类主要从脐带血细胞证明剂量艾曲波帕，从500-2000ng/mL，刺激文化的可输出13天proplatelet形成的4倍，相比，10ng/mL传真照片。通过表面标记物(CD61和CD42)和转录因子(RUNX1，NFE2)的表达证实了MKs的存在。与TPO相比，MKs的百分比和倍性均无差异，这与另一组的结果相似。　　

　　相反，另一项研究表明，romiplostim对巨核生成的影响与TPO不同，它刺激MK增殖，但不成熟，多倍体MK较少，血小板原形成显著减少。然而，这种效应剂量相关，与AKT的over-activation但不是ERKromiplostim高的浓度，同时增加房产申诉专员署剂量over-activatedAKT和ERKpathways。这些结果表明两种不同机制的行动传真照片和romiplostim绑定在同一网站MPL和预计将激活MPL相同的构象。　　

　　此外，DiBuduo等人还开发了一种新颖的体外巨核生成研究方法，利用基于3D丝质骨髓系统的生物反应器技术，重现了巨核生成和血栓生成的关键步骤。丝素是一种天然的生物相容性材料与非血栓形成的特点，完全适合研究血液细胞生产的体外。事实上，作者之前已经证明了这个3D系统不仅为研究造血的基本生物学机制提供了工具，而且也为临床应用提供了工具。　　

　　在DiBuduo等人的研究中，将来自脐带血的人类CD34+祖细胞接种于丝海绵中13天，之后根据特定的表面标记观察MKs。另外，在含有MKs的丝海绵中嵌入的丝微管用于分析血小板释放，证明这些MKs和血小板是完全功能的，即使产量低于体外2D培养。因此，通过使用该技术，他们也证明了艾曲波帕介导MKs的分化和体外血小板释放。　　

　　为了阐明艾曲波帕与TPO或romiplostim相比的作用机制，作者研究了CD34+祖细胞和MKs激活的信号通路。他们发现艾曲波帕诱导了STAT3/5、AKT和ERK通路的磷酸化，这与另一项研究一致。这些分子不仅参与增殖和分化，也参与生存和抗凋亡过程。有趣的是，他们发现，与TPO相比，在细胞因子饥饿后，艾曲波帕再刺激的MKs或祖细胞中的信号增强。　　

　　此外，出乎意料地，他们发现MKs或祖细胞体外治疗各种剂量的艾曲波帕也提出了一个更大的剂量依赖性激活这些信号分子与传真照片。这些结果可能解释知道MPL可以假设不同中间构象活性和配体之间，与其他受体如促红细胞生成素受体。这些不同的构象以不同的方式激活下游信号通路。更特别的是，最近有研究表明，艾曲波帕通过诱导MPL在H499残基周围跨膜螺旋的高效二聚来激活MPL。　　

　　此外，AKT和ERK激活艾曲波帕在更高程度上比传真照片，虽然romiplostim曾表示强烈激活AKTERK.轻微影响而在每次megakaryopoiesis似乎一种蛋白激酶磷酸化激活步骤中，它已经表明，ERK通路初强烈诱导megakaryopoiesis但血小板生产后必须关闭。因此，尽管ERK激活增强且持续，但为什么艾曲波帕能增加血小板的生成，这一问题仍然是未知的。我们可以假设:i)同时激活AKT和ERK通路，ii)艾曲波帕介导的信号的不同强度和/或调控(持续信号随时间变化)，iii)艾曲波帕激活新的分子和信号通路。　　

　　艾曲波帕激活MPL的方式类似于MPLS505N和MPLW515K/L/R突变引起的与骨髓增生性肿瘤和遗传性血小板增多症相关的组成性MPL激活。因此，我们可以推测这种非生理的信号激活，类似于致瘤激活，可能非常有效，但必须在长期使用艾曲波帕治疗的患者中仔细评估，以消除发生恶性血液疾病的风险。　

　　总之，在DiBuduo等人的研究中使用艾曲波帕（艾曲博帕）获得的数据明显支持在血小板减少症患者中短时间使用该分子增加血小板计数。然而，长期使用这种分子还需要更多的研究，特别是MPL信号通路的非生理激活。详情请扫码咨询：