卡博替尼(Cabozantinib)对肿瘤生长和转移的影响

　　MET在乳头状肾细胞癌（pRCC）的发生和发展中起着重要作用。MET抑制剂针对pRCC的疗效评估受到描述MET异常的有限临床前模型的阻碍。我们建立了带有MET激活突变的pRCC的新患者源异种移植（PDX）模型，并测试了卡博替尼（Cabozantinib）抑制肿瘤生长和转移的能力。将通过肾切除术获得的pRCC标本精确切割的薄组织切片植入RAG2--/-γC-/-的肾囊下小鼠建立第一代TSG-RCC-030。通过免疫组织化学，直接DNA测序和定量聚合酶链反应（qPCR）表征了该模型的组织学，遗传保真度和转移潜力。评估卡博替尼对肿瘤生长和转移的影响。

　　通过等位基因特异性qPCR测量循环肿瘤DNA（ctDNA）是否可以用作肿瘤生长和对治疗反应的生物标志物。肾下和皮下肿瘤移植物显示高摄取率并转移至肺。原发性肿瘤和转移灶均表达pRCC的典型标志物，并具有与亲代肿瘤相同的激活性MET突变。卡博替尼治疗导致TSG-RCC-030显着的肿瘤消退并抑制了肺转移。血浆ctDNA水平与对照组小鼠的肿瘤体积相关，并随着卡博替尼的治疗而改变。TSG-RCC-030提供了一个现实的临床前模型，可以更好地了解具有MET突变的pRCC的发展和进展，并加快pRCC新疗法的开发。

　　为了确定FDA批准的用于治疗甲状腺髓样癌的MET抑制剂Cabozantinib在我们的PDX模型中是否有抑制肿瘤生长，我们在10只小鼠中产生了皮下TSG，并在TSG达到约100-200 mm时将它们随机分为对照组和治疗组3。TSGs在对照组中持续生长，在21 d内肿瘤体积增加了10倍。相反，在21天治疗结束时，用30 mg / kg卡博替尼治疗的小鼠（一次/每天，7天/周），TSG体积减少了> 14倍。在治疗的小鼠中未观察到与治疗相关的显着不良反应，例如，小鼠维持与对照组相似的体重。此外，在整个研究过程中，对照组的TSG的平均比增长率为11–17％，而治疗组的TSG的平均比增长率为负13–23％，从而使肿瘤几乎完全消退。一致地，对照小鼠的肿瘤细胞显示出强烈的Ki67核染色，而处理过的小鼠的肿瘤细胞未增殖。此外，在对照组但未治疗的小鼠的TSG中观察到高水平的磷酸化MET（介导MET激活下游响应的MET活性形式），表明卡博替尼与其他癌症一样在pRCC中抑制MET磷酸化。最后，与对照小鼠相比，磷酸化ERK（磷酸化MET的下游靶标）水平显着降低了。这些结果表明卡博替尼在抑制带有活化MET突变和降低的MET活性的TSG-RCC-030的肿瘤生长方面非常有效。

　　为了确定卡博替尼是否抑制肺转移，我们使用人类特异性GAPDH引物进行了qRT-PCR，假设在小鼠肺部检测到的所有人类细胞均为转移性肿瘤细胞。对照小鼠的肺组织中人GAPDH的水平比治疗小鼠的肺中高735倍，表明卡博替尼在抑制肺转移方面具有很高的功效。一致地，表达人特异性核抗原Ku70的肿瘤细胞仅在对照组的肺中被检测到，而未在治疗的小鼠中被检测到。这些细胞还表达了pRCC的典型标志物，例如Pax-8，确认这些细胞的pRCC来源。

　　我们的结果表明卡博替尼在抑制带有MET激活突变的pRCC方面非常有效，表明卡博替尼在治疗这种RCC亚型的患者亚群中发挥了作用。不幸的是，尽管MET在pRCC中起着关键作用，但2项最近完成的临床试验，仅在具有明确细胞组织学的患者中研究卡博替尼在RCC中的安全性和有效性。在第一阶段的研究中，Choueiri等人报道在25例（28％）转移性ccRCC患者中观察到7例有部分反应。中位无进展生存期（PFS）为12.9个月，中位总生存期为15.0个月。

　　在更大的针对658例晚期ccRCC患者的III期研究中，同一研究者观察到卡博替尼的客观缓解率（ORR）为21％，中位PFS为7.4个月，依维莫司的ORR为5％，PFS为3.8个月，是高级ccRCC的标准二线治疗方法。卡博替尼在晚期ccRCC中的高疗效并不令人惊讶，因为它可以抑制包括MET，VEGF受体和AXL在内的多种酪氨酸激酶，并且由于ccRCC中VHL失活而导致MET和AXL上调。微信扫描下方二维码了解更多：