厄达替尼erdafitinib作用效果的一些详情

　　过表达 ABCB1 或 ABCG2 的细胞对厄达替尼（erdafitinib）没有抗性

　　以前的报道表明，ABCB1和ABCG2能够effluxing受体酪氨酸激酶（RTKs），如舒尼替尼的小分子抑制剂的和伊马替尼出癌细胞。因此，过表达 ABCB1 和 ABCG2 的癌细胞对这些 RTK 抑制剂治疗的敏感性较低。为此，在药物敏感的人类癌细胞和过表达 ABCB1 或 ABCG2 的多药耐药变体以及稳定转染人类 ABCB1 或 ABCG2 的 HEK293 细胞和 HEK293 细胞中测定了厄达替尼的细胞毒性。ABCB1 过表达的多药耐药 KB-V-1 人表皮癌细胞、NCI-ADR-RES 人卵巢癌细胞、ABCB1 转染的 MDR19-HEK293 细胞，以及相应的药物敏感亲本 KB-3-1、OVCAR -8 和 pcDNA-HEK293 细胞对厄达替尼治疗同样敏感。同样，过表达ABCG2的多药耐药H460-MX20人肺癌细胞、S1-M1-80人结肠癌细胞、ABCG2转染的R482-HEK293细胞，以及相应的药物敏感亲本H460、S1和pcDNA-HEK293细胞厄达替尼治疗也同样敏感。

　　厄达替尼逆转由 ABCB1 介导的多药耐药性

　　据报道，几种受体酪氨酸激酶抑制剂 (RTKI) 与 ABCB1 和/或 ABCG2 强烈相互作用，并在过表达 ABCB1 和/或 ABCG2 的癌细胞中逆转多药耐药。因此，确定了厄达替尼对由 ABCB1 和 ABCG2 介导的多药耐药的影响。首先，在不显着影响药物敏感的亲代细胞的情况下，ABCB1 过表达的多药耐药 KB-V-1 的化学敏感性、NCI-ADR-RES和 ABCB1 转染的 MDR19-HEK293 细胞紫杉醇，一种已知的 ABCB1 底物 ，被厄达替尼以浓度依赖性方式恢复。类似地，在这些多重耐药细胞系中，厄达替尼逆转了 ABCB1 介导的对长春新碱的耐药性，长春新碱是另一种众所周知的 ABCB1底物。与此相反，厄达替尼对托泊替康或SN-38，已知底物ABCG2介导的抗性为ABCG2 ，在ABCG2过表达多药耐药H460-MX20，S1-M1-80和ABCG2-转染的 R482-HEK293 细胞。值得注意的是，维拉帕米和 Ko143 分别用作 ABCB1 和 ABCG2 的参考抑制剂。化学敏化的由厄达替尼或维拉帕米或Ko143能在特定细胞系中的程度是由折叠反转（FR）值，通过将IC算出表示50由IC特定药物基底的值50在药物基底的值厄达替尼或维拉帕米或 Ko143 的存在。我们的结果显示，在亚毒性浓度下，厄达替尼选择性地逆转 ABCB1 介导的多药耐药人类癌细胞系中的多药耐药。

　　厄达替尼恢复 ABCB1 过表达细胞中的细胞内药物积累

　　药物外排功能的直接抑制和药物转运蛋白的瞬时下调是调节剂使多药耐药癌细胞对化疗药物重新敏感的两种最常见方式。为此，厄达替尼对 ABCB1 介导的钙黄绿素（一种 ABCB1 底物钙黄绿素-AM 的荧光产物和 ABCG2 介导的脱镁叶绿素 A（PhA）（一种 ABCG2 的荧光底物）流出的影响, 在过表达 ABCB1 或 ABCG2 的细胞中确定。1 μM 的厄达替尼显着增加了 MDR19-HEK293 细胞中钙黄绿素的细胞内积累和 NCI-ADR-RES 细胞。相比之下，厄达替尼对 R482-HEK293 细胞中 PhA 的细胞内积累的影响很小。和 S1-M1-80 细胞。值得注意的是，3 μM 的 tariquidar 用作 ABCB1 的参考抑制剂，而 1 μM 的 Ko143 用作 ABCG2 的参考抑制剂。厄达替尼、tariquidar 和 Ko143 对亲代细胞系的细胞内药物积累没有显着影响。此外，厄达替尼在 MDR19-HEK293 细胞、NCI-ADR-RES 和 KB-V-1 细胞中以浓度依赖性方式抑制 ABCB1 介导的钙黄绿素外流。计算出的 IC50值分别约为 1.8 μM、3.6 μM 和 9.3 μM。

　　接下来，在过表达 ABCB1 的 NCI-ADR-RES 和 KB-V-1 癌细胞中检查了厄达替尼对 ABCB1 蛋白表达的潜在影响。如材料和方法中所述，用浓度增加的厄达替尼（0.1-1.0 μM）处理细胞 72 小时，然后进行免疫印迹。厄达替尼对 NCI-ADR-RES 或 KB-V-1 癌细胞系中 ABCB1 的蛋白表达没有显着影响。我们的数据表明，厄达替尼通过抑制 ABCB1 的药物转运功能而不是通过下调 ABCB1 过表达癌细胞系中的 ABCB1 蛋白来逆转多药耐药。在厄达替尼的价格是多少？更多详情可咨询下方微信。