他达拉非Ttadalafil可改变mdx小鼠心脏中的β1-肾上腺素能反应

　　雄性mdx小鼠在4周龄时开始他达拉非（tadalafil）治疗（0.1mg*mL-1补充饮用水）。在治疗的8个月中未观察到不良反应后，我们研究了他达拉非（tadalafil）保护mdx心脏免受β1-肾上腺素能激动剂多巴酚丁胺攻击的能力，该作用在缺乏肌营养不良蛋白的情况下会加剧心脏功能障碍。　　

　　这个实验中，尽管基线时射血分数或分数缩短不存在差异，他达拉非（tadalafil）明显降低了多巴酚丁胺输注引起的射血分数和分数缩短的升高。有趣的是，多巴酚丁胺攻击增加了他达拉非（tadalafil）的靶蛋白PDE5，这在未经刺激的mdx心脏中无法通过免疫印迹检测到。　　

　　尽管对照和他达拉非（tadalafil）治疗之间的PDE5蛋白水平没有显着差异，仅在不存在他达拉非（tadalafil）的情况下，通过多巴酚丁胺给药可提高Pde5基因的表达。这表明可能存在大量转录后抑制的Pde5对急性应激有反应。　　

　　尽管PKG1α（由于PDE5抑制而导致cGMP升高的主要细胞内效应激酶）的含量没有变化，但我们观察到PKG目标GSK1β的磷酸化水平显着增加，而ERK1/2（心脏病理介质）的磷酸化水平下降，在他达拉非（tadalafil）治疗的心脏中。多巴酚丁胺引起的SERCA2损失在对照组中发生，但在他达拉非（tadalafil）治疗的动物中未发生，随着分数缩短的变化而变化与SERCA2含量成反比。　　

　　这表明SERCA2的保存可能在他达拉非（tadalafil）治疗引起的多巴酚丁胺诱导的肌力降低中起作用。在没有多巴酚丁胺的情况下，未处理和他达拉非（tadalafil）治疗的心脏之间未发现测量蛋白质的含量变化。　　

　　因为肌钙蛋白，PKG1α的另一个直接目标激酶的活性，还会修改收缩力，我们评估磷酸化的cTnI水平作为一种保护机制。实际上，多巴酚丁胺输注可降低未经治疗的心脏中的磷酸化cTnI水平。　　

　　然而，这是由于cTnI的丢失，而不是磷酸化的变化所致。无论SERCA2和肌钙蛋白是被称为钙蛋白酶，细胞内的蛋白酶目标，因此，我们寻找的其他已知的蛋白酶目标损失。在多巴酚丁胺应激的对照中，与肌节相关的蛋白phosphorlamban和肌动蛋白均被降解；因此，他达拉非（tadalafil）保存收缩性相关蛋白的原因可能是蛋白酶表达和激活的调节。　　

　　因此，我们发现了μ-钙蛋白酶（也称为钙蛋白酶1）的存在，该蛋白酶主要靶向与肌小节相关的蛋白质，在多巴酚丁胺应激下会升高，尽管在他达拉非（tadalafil）治疗的心脏中其含量明显降低。这些数据提供了一个模型，其中营养不良性心脏中的短暂心脏应激（例如由肾上腺素刺激引起的应激）增加了PDE5含量和表达，从而降低了cGMP含量，并最终由于肌节蛋白的蛋白水解作用而导致了心脏功能障碍。他达拉非（tadalafil）保护作用的基础可能涉及防止瞬态应激源（如肾上腺素能反应）造成的损害。详情请扫码咨询：