乐伐替尼7080治疗的肿瘤细胞中收集并测序了RNA

　　调查乐伐替尼（乐伐替尼7080）的免疫调节活动，除了已知antiangiogenetic活动，我们比较乐伐替尼（乐伐替尼7080）抗肿瘤活性的免疫活性的老鼠(Balb/cwt/wt老鼠)的免疫缺陷小鼠(学校Balb/制度/ν老鼠)通过使用CT26小鼠结肠癌癌模型(CT26模型)和BNLA.7R1。小鼠肝癌细胞(BNL模型)。与对照组相比，乐伐替尼（乐伐替尼7080）(10mg/kg)在两种小鼠模型中均抑制了肿瘤生长，但与Balb/cnu/nu小鼠相比，CT26同种移植在Balb/cwt/wt小鼠中的肿瘤生长显著延迟。　

　　3和10mg/kg的乐伐替尼（乐伐替尼7080）也抑制了Balb/cnu/nu小鼠BNL模型的肿瘤生长，但只引起Balb/cwt/wt小鼠BNL肿瘤的收缩。这些发现表明乐伐替尼（乐伐替尼7080）在具有免疫功能的肿瘤微环境中具有更强的抗肿瘤活性。　　

　　为了研究乐伐替尼（乐伐替尼7080）对肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-浸润淋巴细胞，TILs)的影响，我们对BNL肿瘤组织中TILs(CD45+细胞)进行了单细胞基因表达分析。我们分别从301和220个未治疗和乐伐替尼（乐伐替尼7080）治疗的肿瘤细胞中收集并测序了RNA。tSNE分析表明，乐伐替尼（乐伐替尼7080）处理组和载体组的总TILs(521个细胞)可分为3个免疫细胞群。　　

　　与未治疗相比，乐伐替尼（乐伐替尼7080）增加了C1类免疫细胞数量，但减少了C3类免疫细胞数量。免疫细胞群的基因标记物表明，T细胞、NK细胞和细胞毒性细胞标记物均由c1类细胞表达。中性粒细胞标记物由c2型细胞表达。巨噬细胞标记物如Cx3cr1、Mrc1和Csf1r在c3类细胞中均有表达。提示乐伐替尼（乐伐替尼7080）降低TAM细胞数量，但增加T、NK和细胞毒性细胞数量。　　

　　流式细胞分析结果与单细胞分析结果一致，在CT26模型和BNL模型中，与对照组相比，乐伐替尼（乐伐替尼7080）治疗显著降低了TAM群体(门控为CD45+CD11b+Ly6G−Ly6C−F4/80+)。此外，免疫组化分析显示乐伐替尼（乐伐替尼7080）治疗后肿瘤中CD11b+F4/80+双阳性细胞数量减少。这些结果表明，乐伐替尼（乐伐替尼7080）降低了CT26和BNL模型的TAM种群数量。　　

　　在CT26模型中，使用抗csf1r抗体检测TAM缺失对T细胞激活的影响。在抗Csf1r抗体的存在下，Prf1和GzmB的表达增加，而tam相关基因如Csf1r、Cx3cr1和Itgam的表达降低。这些数据表明，乐伐替尼（乐伐替尼7080）减少TAM浸润可能导致CD8+T细胞激活。详情请扫码咨询：