SIRT1逆转索拉非尼/多吉美诱导的肝癌细胞凋亡

　　SIRT1过表达抵消了聚合酶1的裂解，表明具有抗凋亡作用。与此相一致，在SIRT1过表达的细胞中p53的脱乙酰基增加，而总p53水平降低。促凋亡因子p53上调的细胞凋亡调节剂（PUMA）的表达受p53调控，发现与载体转染的细胞相比，索拉非尼（多吉美）治疗的SIRT1过表达细胞中的表达略有降低。p53-PUMA途径可能与SIRT1诱导的抗凋亡作用有关。

　　晚期肝癌的少数全身治疗选择之一是多激酶抑制剂索拉非尼，但是，它并不能在所有患者中获得成功的治疗。原因之一可能是NAD依赖性脱乙酰基酶SIRT1的异常表达，它调节癌症的耐药性。研究表明，SIRT1过表达的肝癌对索拉非尼的耐药性更高，生长更积极，与非SIRT1过表达的肿瘤患者相比，这些肿瘤的患者预后更差。基于这些发现，我们询问SIRT1蛋白的修饰或活性是否可以改变肿瘤细胞对HCC细胞系中索拉非尼的反应。

　　索拉非尼靶向肿瘤发展和进展中的几个主要过程。具体而言，索拉非尼能够抑制VEGF信号通路的酪氨酸激酶，从而减少肿瘤血管生成和RAF激酶，与抑制MAPK/ERK通路相关，从而导致细胞增殖减少。这与我们的研究一致，表明我们使用的所有细胞系均对索拉非尼治疗产生凋亡反应。其他研究表明，索拉非尼通过Bax的线粒体易位和细胞色素c的释放诱导细胞凋亡的内在途径。这与我们的结果一致，表明索拉非尼诱导线粒体功能障碍和细胞ATP水平降低。

　　SIRT1使蛋白质脱乙酰基并调节其转录或活性，从而影响细胞能量代谢以及应激反应途径。 SIRT1的活性取决于NAD的水平，因此取决于NAMPT对NAD的挽救。有趣的是，虽然索拉非尼孵育不会改变NAMPT蛋白的丰度和活性，但在我们的研究中使用的HCC细胞系中NAD的水平却显着下调。我们没有发现证据表明使用索拉非尼孵育后，NAD消耗酶聚（ADP-核糖）聚合酶1和SIRT1的活性均增加，但在Hep3B中没有改变，而在HUH7中有所降低，可能是通过p53依赖性的微小RNA-34a的上调。有趣的是，与索拉非尼一起孵育后，我们显示了HUH7细胞中microRNA-34a的增加。在肝癌大鼠中，索拉非尼治疗肺转移后，rno-miR-34a-5p上调。此外，微小RNA-34a已显示使肝癌细胞对索拉非尼治疗敏感。因此，索拉非尼对microRNA-34a的上调可能是HUH7细胞中SIRT1下调的可能的潜在机制。

　　我们显示与索拉非尼一起孵育可降低线粒体耗氧量，这在心肌细胞和HCC细胞中已有描述。与另一项研究相反，我们发现索拉非尼可直接抑制复合物I活性，而索拉非尼处理的细胞中柠檬酸合酶活性较低则可检测线粒体质量的降低。与诱导线粒体功能障碍一致，索拉非尼降低了肝癌细胞中的ATP水平，并激活了细胞能量传感器AMPK。与原代人肝细胞相比，AMPK在肝癌细胞系中的磷酸化程度较低，因此活性较低。活性AMPK抑制mTOR及其下游靶标p70S6K和4EBP1的磷酸化，它们分别是细胞增殖和蛋白质生物合成的重要调节剂。这与另一项研究相反，后者表明索拉非尼不影响AMPK激活或ATP水平，这可以通过使用低得多的剂量的索拉非尼来解释。有趣的是，视黄酸激活的AMPK使HepG2细胞对索拉非尼治疗敏感。

　　先前的研究表明，患者肝癌组织中较高的SIRT1水平与较差的结果和对索拉非尼的耐药性增加有关。因此，我们询问SIRT1的下调是否会使HCC细胞对索拉非尼敏感。 FK866是一种特殊的NAMPT抑制剂，可降低与较低SIRT1活性相关的NAD水平，并诱导HCC细胞系凋亡。 FK866与依托泊苷的组合可通过乙酰化和随后p53的积累使白血病细胞系对依托泊苷治疗敏感。现在购买索拉非尼的途径也是非常多，如果您有需要可添加下方微信，我们会提供购买。